·实验研究·培养软骨移植修复兔生长板陈旧性缺损△王建杨志明秦廷武解慧琪摘要目的:将培养软骨移植修复生长板陈旧性缺损,防止肢体畸形发生,减轻畸形程度。方法:分离1月龄兔软骨细胞,经离心管内培养形成软骨。在6周龄兔右侧胫骨上端生长板造成缺损,4周后再次手术切除缺损内组织,植入培养2周软骨。左侧胫骨经相同处理,但无植入物,为自身对照。于4、8、12周行X线照片、组织学、免疫组化检查。结果:移植培养软骨4、8、12周时右侧胫骨畸形增加程度显著低于左侧,生长板缺损区由软骨组织充填,结构完整,Ⅱ型胶原免疫组化染色阳性。左侧胫骨畸形加重,生长板缺损区内骨桥形成,提前闭合。结论:培养软骨移植生长板陈旧性缺损,可以明显减轻肢体畸形程度,但不能纠正已发生畸形。关键词培养软骨;移植;生长板;组织工程中图分类号687文献标识码A文章编号1005-8478(2001)10-0980-04TheRepairofOldDefectsofRabbits’GrowthPlateswithGraftsofCulturedCartilage∥WANGJian,YANGZhi2ming,QINTing2wu,etal.DepartmentofOrthopedicSurgery,theFirstUniversityHospital,WestChinaUniversityofMedicalSciences,Chengdu610041AbstractObjective:Topreventoccurrenceoflimb’sdeformitiesandreducedeformitiesbyallograftsofculturedcartilagesintooldgrowthplatedefects.Methods:Chondrocytesisolatedfromrabbitsagedlmonthformedcartilagesaftercultivationincentrifugetubes.Defectsformedinuppertibialgrowthplatesofrabbitsaged6weeksunderwentthesecondoperation4weekslater.Thetissueswithindefectswereresectedandreplacedbycartilagesculturedfortwoweeks.Lefttibialdefectshadnograftascontrolgroups.X2ray、histologi2calandimmunohistochemicalexaminationswereperformedat4,8,and12weeksaftersurgery.Results:Righttibiaehadmarkedlylessdeformitiesthanleftonesat4,8,and12weeksaftertransferofculturedcartilages.Growthplatedefectsofrighttibiaewerefilledwithcartilaginoustissues,whosestructurewasintact.ImmunohistochemicalstainingoftypeⅡcollagenwaspositive.Thedeformitiesoflefttibiaehaddeveloped.Bonybridgesformedindefectsofgrowthplateswhichwereearlyclosed.Conclusion:Culturedcartilagesmayobvi2ouslyreducelimbdeformitiesbyallograftintogrowthplatedefects,butcan’tcorrectexistentdeformities.KeywordsCulturedcartilage;Graft;Growthplate;Tissueengineering△国家基础研究发展规划(973)项目(G1999054308)国家自然科学基金重点项目(39830100)作者单位:华西医科大学附属第一医院骨科,成都610041作者简介:王建(19652),男,成都市人,讲师,医学博士。研究方向:修复重建外科。电话:(028)5422105生长板损害所导致的并发症如肢体不等长、成角和旋转畸形,影响肢体形态和功能。生长板损害常用的治疗方法包括骨桥切除再开放术及局部填充脂肪、骨水泥、聚合硅及骨蜡等1,2,游离软骨3和血管化软骨移植4,组织工程软骨移植等。这些方法可不同程度地防止和矫正肢体发育畸形,但效果尚欠满意。生长板损伤修复实验研究侧重于缺损即刻移植修复,其中培养软骨植入兔生长板缺损,可以替代缺损的生长板软骨,维持肢体正常生长,防止肢体畸形。本文探讨培养软骨移植对修复兔生长板陈旧性损伤的治疗效果。1材料与方法1.1软骨细胞培养形成软骨及移植取1月龄兔肱骨头、股骨两端关节软骨,切成1mm3大小。于37℃水浴中0.25%胰蛋白酶(Gibco产·089·中国矫形外科杂志2001年10月第8卷第10期OrthopJChin,Vol.8,No.10October2001品)消化30min,0.2%Ⅱ型胶原酶(Sigma产品)消化2.5h。过200目筛收集软骨细胞,按2.5×106/管离心(1000rpm、5min)后连续培养2周。培养条件:含10%小牛血清、100u/ml青霉素、100ug/ml链霉素、50ug/ml维生素C的DMEM(Gibco产品),培养液pH值为7.4,37℃、5%CO2浓度和饱和湿度。自接种后第3d起隔日更换培养液。6周龄新西兰兔24只,雌雄不限,戊巴比妥钠静脉麻醉,常规无菌手术操作。取双侧胫骨上端前内侧切口,用尖刀全层切除生长板前内侧部分,约占胫骨上端生长板面积1/3～1/2,勿损伤膝内侧副韧...
