课题2-多聚酶链式反应扩增DNA片段-(2)VIP免费

多聚酶链式反应多聚酶链式反应扩增扩增DNADNA片断片断一、基础知识一、基础知识（一）（一）DNADNA分子的结构分子的结构CC、、HH、、OO、、NN、、PP11、组成元素、组成元素脱氧核苷酸脱氧核苷酸22、基本单位、基本单位33、脱氧核苷酸结构、脱氧核苷酸结构脱氧核脱氧核苷酸苷酸脱氧核苷脱氧核苷磷酸磷酸脱氧核糖脱氧核糖含氮含氮碱基碱基嘌呤嘌呤嘧啶嘧啶腺嘌呤（腺嘌呤（AA））鸟嘌呤（鸟嘌呤（GG））胞嘧啶（胞嘧啶（CC））胸腺嘧啶（胸腺嘧啶（TT））一个核苷酸上的一个核苷酸上的磷酸基团上的“－磷酸基团上的“－OH”OH”和和另另一个核苷酸分子的第三位碳原子上的羟基一个核苷酸分子的第三位碳原子上的羟基之间之间失去一分子水，形成失去一分子水，形成磷酸二脂键，磷酸二脂键，即在即在相邻的相邻的两个脱氧核苷酸的两个脱氧核苷酸的3’3’和和5’5’碳原子碳原子之间形成之间形成磷酸二脂键。数量庞大的四种脱氧核苷酸通过磷酸二脂键。数量庞大的四种脱氧核苷酸通过3’3’、、5’5’、磷酸二脂键彼此连接起来形成脱、磷酸二脂键彼此连接起来形成脱氧核苷酸链。氧核苷酸链。通常将通常将DNADNA的羟基“－的羟基“－OH”OH”末末端称为端称为3’3’端，而磷酸基团的末端称为端，而磷酸基团的末端称为5’5’端端44、多脱氧核苷酸链得形成、多脱氧核苷酸链得形成脱氧核苷酸结构式脱氧核苷酸结构式OOPOHO碱基OOHOOPOHOOH碱基5’3’3’5’碱基碱基脱氧核糖脱氧核糖磷酸基团磷酸基团碱基碱基脱氧核糖脱氧核糖碱基碱基脱氧核糖脱氧核糖5’3’多脱氧核苷酸链结构简图多脱氧核苷酸链结构简图55、、DNADNA分子的双螺旋结构分子的双螺旋结构①①DNADNA分子是由两条反向平行的（即一分子是由两条反向平行的（即一条链为条链为3’3’－－5’5’，另一条链为，另一条链为5’5’－－3’3’）脱氧核苷酸长链盘旋而成的规则双）脱氧核苷酸长链盘旋而成的规则双螺旋结构螺旋结构②②脱氧核糖与磷酸交替连结，排列在外侧，脱氧核糖与磷酸交替连结，排列在外侧，构成基本骨架；碱基排列在链的内侧构成基本骨架；碱基排列在链的内侧③③两条链上的碱基通过氢键连结起来，形成两条链上的碱基通过氢键连结起来，形成碱基对。碱基对的组成有特定的规律：即腺碱基对。碱基对的组成有特定的规律：即腺嘌呤一定与胸腺嘧啶配对，鸟嘌呤一定同胞嘌呤一定与胸腺嘧啶配对，鸟嘌呤一定同胞嘧啶配对嘧啶配对66、利用碱基互补配对规律的计算、利用碱基互补配对规律的计算规律一：规律一：DNADNA双链中的两条互补链的碱基相等，双链中的两条互补链的碱基相等，任意两个互补的碱基之和相等即任意两个互补的碱基之和相等即A=TA=T，，G=CG=C。。任意两个不互补的碱基之和恒等，占碱基总数的任意两个不互补的碱基之和恒等，占碱基总数的50%50%。即：。即：A+GA+G＝＝T+CT+C＝＝A+CA+C＝＝T+GT+G＝＝50%50%，（，（A+GA+G））/(T+C)/(T+C)＝＝(A+C)/(G+T)(A+C)/(G+T)＝＝(T+C)/(A+G)(T+C)/(A+G)＝＝11规律二：在规律二：在DNADNA双链中的一条单链双链中的一条单链(A+G)/(A+G)/(T+C)(T+C)的值与另一条互补链的的值与另一条互补链的(A+G)/(T+C)(A+G)/(T+C)的的值互为倒数关系值互为倒数关系规律三：规律三：DNADNA双链中，一条单链的双链中，一条单链的(A+T)/(A+T)/(G+C)(G+C)的值与另一条互补链的的值与另一条互补链的(A+T)/(G+C)(A+T)/(G+C)的值的值是相等的，也与整个是相等的，也与整个DNADNA分子中的分子中的(A+T)/(A+T)/(G+C)(G+C)的值相等的值相等（二）（二）DNADNA分子的特性分子的特性11、稳定性、稳定性在在DNADNA分子双螺旋结构的内侧，分子双螺旋结构的内侧，通过通过氢键氢键形形成的碱基对，使两条脱氧核苷酸长链稳固的并成的碱基对，使两条脱氧核苷酸长链稳固的并联起来联起来例题：甲例题：甲DNADNA分子中，分子中，AA和和TT占占2525％，％，GG和和CC占占75%75%，乙，乙DNADNA分子中，分子中，GG和和CC占占2525％，％，AA和和TT占占75%75%，哪一个稳定？，哪一个稳定？答：甲答：甲DNADNA分子比乙分子比乙DNADNA分子稳定。因为分子稳定。因为AA与与TT之间形成两个氢键，之间形成两个氢键，在在GG和和C...