江门市新会华侨中学黄良一一..基础知识基础知识㈠㈠..纤维素与纤维素酶纤维素与纤维素酶1.1.纤维素纤维素棉花棉花是自然界中纤维素含量最高的天然产物。是自然界中纤维素含量最高的天然产物。纤维素是一种由纤维素是一种由葡萄糖葡萄糖首尾相连而成的首尾相连而成的高分高分子子化合物化合物,是含量最丰富的,是含量最丰富的多糖类物质多糖类物质。。纤维素可用于纺织工业,可造纸;纤维素可用于纺织工业,可造纸;纤维素能被土壤中某些微生物分解利用,纤维素能被土壤中某些微生物分解利用,这是因为它们能够产生这是因为它们能够产生纤维素酶纤维素酶。。2.2.纤维素酶纤维素酶纤维素酶是一种复合酶,一般认为它至少纤维素酶是一种复合酶,一般认为它至少包括三种组分,即包括三种组分,即CC11酶酶((外切酶外切酶))、、CCXX酶酶((内内切酶切酶))和和葡萄糖苷酶葡萄糖苷酶,前两种酶使纤维素分解,前两种酶使纤维素分解成成纤维二糖纤维二糖,第三种酶将,第三种酶将纤维二糖纤维二糖分解成分解成葡萄葡萄糖糖。。纤维二糖C1酶、Cx酶葡萄糖苷酶葡萄糖纤维素3.3.纤维素的分解:纤维素的分解:土壤中某些微生物土壤中某些微生物((真菌、放线菌及细菌))能够产生能够产生纤维素酶,,把纤维素分解为葡萄糖,把纤维素分解为葡萄糖,后再利用后再利用。。下列生物能分解纤维素的是()①人②兔③牛④蘑菇⑤纤维杆菌A.B.①②③④⑤②③⑤C.D.②③④⑤③⑤C兔、牛等草食性动物的肠胃中的共生微生物可合成纤维素酶分解纤维素。蘑菇、纤维杆菌能分泌纤维素酶分解纤维素;人不能消化纤维素。在一支试管中添加纤维素酶,另一支试管不添加纤维素酶;〖思考1〗P27的小实验是如何构成对照的?滤纸崩溃法4、纤维素酶活性的测定实验:方法:滤纸崩溃法(二)纤维素分解菌的筛选1、筛选纤维素分解菌的方法______________。优点:该方法可以通过________反应直接筛选。刚果红染色法颜色2、其原理是:刚果红可以与纤维素形成____________,当纤维素被_________分解后,红色复合物无法形成,出现以_____________为中心的________,可以通过___________________________来筛选纤维素分解菌。红色复合物纤维素酶纤维素分解菌透明圈是否产生透明圈可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌透明圈大的,分解纤维素的能力就强啦(三)、实验设计土壤取样选择培养梯度稀释将样品涂布到鉴别培养基挑选菌落什么样的环境取样?①培养的目的?②选择培养基的特点?挑选什么样的菌落?①鉴别培养基的特点?②如何鉴别?根据:微生物对生存环境的要求,到相应环境中去找;目的:增加纤维素分解菌的浓度,以确保能够从样品中分离到所需要的微生物;刚果红染色法(三)、实验设计土壤取样选择培养梯度稀释将样品涂布到鉴别培养基挑选菌落〖旁栏思考1〗本实验流程与尿素分解菌的分离实验流程有哪些异同?尿素分解菌的分离实验流程是将土样制成的菌悬液直接涂布在选择培养基上;本课题通过选择培养使细菌增殖后,再涂布在鉴别培养基上。其它操作基本基本相同。选择纤维素丰富的环境,如树林中多年落叶形成的腐殖土,多年积累的枯枝败叶等等。生物与环境的互相依存关系,在富含纤维素的环境中纤维素分解菌的含量相对提高,因此从这种土壤中获得目的微生物的几率要高于普通环境〖旁栏思考2〗取样的环境是怎样的,作出这种选择的理由是什么?根据微生物对生存环境的要求,到相应环境中去找;【资料一】土壤取样人工设置适宜环境,使纤维素分解菌相对聚集。将纸埋于深约10cm的腐殖土壤中。〖旁栏思考3〗将滤纸埋在土壤中有什么作用?你认为滤纸应该埋进土壤多深?增加纤维素分解菌的浓度增加纤维素分解菌的浓度,以确保能够从,以确保能够从样品中分离所需要的微生物。样品中分离所需要的微生物。①①选择培养的目的:目的:②②制备选择培养基:制备选择培养基:③③操作:操作:将土样加入装有将土样加入装有30ml30ml选择培养基的锥选择培养基的锥形瓶中,将锥形瓶固定在摇床上,在一定温度形瓶中,将锥形瓶固定在摇床上,在一定温度下下震荡培养震荡培养11~~22天,直至培养液变浑浊。天,直至培养液变浑浊。也也可重复选择培养。可重...