细胞培养常见问题及回答VIP免费

细胞培养常见问题及回答（一）1.如何选用培养基？培养某一类型细胞没有固定的培养条件。在MEM中培养的细胞，很可能在DMEM或M199中同样很容易生长。总之，首选MEM做粘附细胞培养、RPMI-1640做悬浮细胞培养，各种目的无血清培养的首选是AIMV培养基（SFM）。在开始进行新的细胞培养时，可以参考下表所列的条件：细胞系细胞类型种组织推荐使用的培养基293成纤维细胞人胚胎肾MEM,10%热灭活马血清3T6成纤维细胞小鼠胚胎DMEM,10%胎牛血清A549上皮细胞人肺癌F-12K,10%胎牛血清A9成纤维细胞小鼠结缔组织DMEM,10%胎牛血清AtT-20上皮细胞小鼠垂体肿瘤F-10,15%马血清和2.5%胎牛血清BALB/3T3成纤维细胞小鼠胚胎DMEM,10%胎牛血清BHK-21成纤维细胞仓鼠肾GMEM,10%胎牛血清或MEM,10%胎牛血清和NEAABHL-100上皮细胞人乳房McCoy'5A,10%胎牛血清BT成纤维细胞牛鼻甲骨细胞MEM,10%胎牛血清和NEAACaco-2上皮细胞人结肠腺癌MEM,20%胎牛血清和NEAAChang上皮细胞人肝脏BME,10%小牛血清CHO-K1上皮细胞仓鼠卵巢F-12,10%胎牛血清Clone9上皮细胞大鼠肝脏F-12K,10%胎牛血清CloneM-3上皮细胞小鼠黑素瘤F-10,15%马血清和2.5%胎牛血清COS-1成纤维细胞猴肾DMEM,10%胎牛血清COS-3成纤维细胞猴肾DMEM,10%胎牛血清COS-7成纤维细胞猴肾DMEM,10%胎牛血清CRFK上皮细胞猫肾MEM,10%胎牛血清和NEAACV-1成纤维细胞猴肾MEM,10%胎牛血清D-17上皮细胞狗骨肉瘤MEM,10%胎牛血清和NEAADaudi成淋巴细胞人淋巴瘤病人血液RPMI-1640,10%胎牛血清GH1上皮细胞大鼠垂体肿瘤F-10,15%马血清和2.5%胎牛血清GH3上皮细胞大鼠垂体肿瘤F-10,15%马血清和2.5%胎牛血清H9成淋巴细胞人T细胞淋巴瘤RPMI-1640,20%胎牛血清HaK上皮细胞仓鼠肾BME,10%小牛血清HCT-15上皮细胞人结肠直肠腺癌RPMI-1640,10%胎牛血清HeLa上皮细胞人子宫颈癌MEM,10%胎牛血清和NEAA(insuspension,S-MEM)HEp-2上皮细胞人喉癌MEM,10%胎牛血清HL-60成淋巴细胞人早幼粒细胞白血病RPMI-1640,20%胎牛血清HT-1080上皮细胞人纤维肉瘤MEM,10%HI胎牛血清和NEAAHT-29上皮细胞人结肠腺癌McCoy's5A,10%胎牛血清HUVEC内皮细胞人脐带F-12K,10%胎牛血清和肝素盐100ug/mlI-10上皮细胞小鼠睾丸癌F-10,15%马血清和2.5%胎牛血清IM-9成淋巴细胞人骨髓瘤病人骨髓RPMI-1640,10%胎牛血清JEG-2上皮细胞人绒毛膜癌MEM,10%胎牛血清Jensen成纤维细胞大鼠肉瘤McCoy's5A,5%胎牛血清Jurkat成淋巴细胞人淋巴瘤RPMI-1640,10%胎牛血清K-562成淋巴细胞人骨髓性的白血病RPMI-1640,10%胎牛血清KB上皮细胞人口腔癌MEM,10%胎牛血清和NEAAKG-1骨髓白细胞人红白血病病人骨髓IMDM,20%胎牛血清L2上皮细胞大鼠肺F-12K,10%胎牛血清L6大鼠骨骼肌成肌细胞DMEM,10%胎牛血清LLC-WRC256上皮细胞大鼠癌Medium199,5%马血清McCoy成纤维细胞小鼠未知MEM,10%胎牛血清MCF7上皮细胞人乳腺癌MEM,10%胎牛血清NEAA,10ug/ml胰岛素WEHI-3b类巨噬细胞小鼠骨髓单核细胞白血病DMEM,10%胎牛血清WI-38上皮细胞人胚胎肺BME,10%胎牛血清WISH上皮细胞人羊膜BME,10%胎牛血清WS1人胚胎皮肤MEM,10%胎牛血清和NEAAXC上皮细胞大鼠肉瘤MEM,10%胎牛血清和NEAAY-1上皮细胞小鼠肾上腺瘤F-10,15%马血清和2.5%胎牛血清2.为什么要热灭活血清？加热可以灭活补体系统。激活的补体参与溶解细胞事件，刺激平滑肌收缩，细胞和血小板释放组胺，激活淋巴细胞和巨噬细胞。在进行免疫学研究、培养ES细胞、昆虫细胞和平滑肌细胞时，推荐使用热灭活血清。3.L－谷氨酰胺在细胞培养中重要吗？它在溶液中不稳定吗？L－谷氨酰胺在细胞培养时是重要的。脱掉氨基后，L－谷氨酰胺可作为培养细胞的能量来源、参与蛋白质的合成和核酸代谢。L－谷氨酰胺在溶液中经过一段时间后会降解，但是确切的降解率一直没有最终确定。L－谷氨酰胺的降解导致氨的形成，而氨对于一些细胞具有毒性。4.GlutaMAX-I是什么？培养细胞如何利用GlutaMAX-I？这个二肽有多稳定？GlutaMAX-I二肽是L－谷氨酰胺的衍生物，将其不稳定的α－氨基用L－丙氨酸来保护。一种肽酶逐渐裂解二肽，释放L－谷氨酰胺供利用。GlutaMAX-I二肽非常稳定，即使在121磅灭菌20分钟，GlutaMAX-I二肽溶液有最小的降解，如果在相同条件下，L－谷氨...