杨黄止痢注射液VIP专享VIP免费

附件2（略）附件3（略）附件4马流感病毒H3亚型血凝抑制试验抗原、阳性血清与阴性血清等4种兽药产品说明书和标签一、马流感病毒H3亚型血凝抑制试验抗原、阳性血清与阴性血清说明书和标签（一）马流感病毒H3亚型血凝抑制试验抗原、阳性血清与阴性血清说明书兽用【兽药名称】通用名马流感病毒H3亚型血凝抑制试验抗原、阳性血清与阴性血清商品名无英文名EquineInfluenzaVirus（H3Sub-type）Antigen,PositiveSeraandNegativeSeraForHemagglutinationInhibitionTest汉语拼音MaliuganBingduH3YaxingXueningyizhishiyanKangyuan，YangxingxueqingYuYinxingxueqing【主要成分与含量】抗原由马流感H3亚型病毒HB株全病毒制备，对0.5%鸡红细胞的HA效价不低于1:128。阳性血清中马流感病毒H3亚型血凝抑制抗体不低于1:80。阴性血清中马流感病毒H3、H7亚型和禽流感病毒H5、H9亚型的血凝抑制抗体均不高于1:10。【性状】抗原为无色透明或半透明液体，久置后会出现少量沉淀；阴、阳性血清为黄色透明液体。【作用与用途】用于马流感病毒H3亚型抗体的检测。【贮藏与有效期】抗原2～8℃保存，有效期24个月；阴、阳性血清-20℃以下保存，有效期24个月。【规格】1ml/瓶【注意事项】（1）血凝和血凝抑制试验简单快速，但影响因素甚多，应严格控制试验条件，包括红细胞悬液和抗原工作浓度，试验时环境温度和作用时间均应准确控制。（2）抗原、血清和PBS若有混浊或霉菌生长，应废弃。（3）工作浓度的抗原应现用现配。【用法与判定】1HA效价测定操作术式采用96孔U型微量板进行试验，反应总体积为100µl。按表1用0.01mol/LpH值7.2～7.6的PBS将抗原2倍系列稀释，然后加入0.5%的鸡红血球（制备方法见附注3），轻轻混匀后置室温35±5分钟，观察凝集反应。表1HA效价测定操作术式孔号123456789101112稀释倍数2-12-22-32-42-52-62-72-82-92-102-11对照稀释液505050505050505050505050（µl）抗原（µl）5050505050505050505050弃去0.5%红血球505050505050505050505050（µl）轻轻混匀，在室温条件下静置35±5分钟，观察凝集反应结果判定方法：将血凝板倾斜45°角20～30秒。100%的红细胞被病毒所凝集（不流淌）判为“++++”，以出现“++++”的最高稀释度作为判定终点。2HI效价测定操作术式2.16个HA单位工作抗原液的制备根据凝集试验的测定结果，用灭菌的PBS配制6个工作单位的抗原。血凝效价除以12为抗原的预稀释倍数。举例如下：抗原的HA效价为1∶128，稀释倍数为128/12=10.6，约11倍稀释，即1ml的抗原液加入到10ml的PBS里进行稀释。抗原配制完成应重新进行标定。2.2HI试验的操作方法应用96孔U型微量板进行试验，血凝试验的反应总体积为100µl，利用PBS液将待测样品（待检血清前处理方法见附注4）做连续倍比稀释后，加入6个HA单位抗原室温作用30分钟，再加入0.5%的鸡红血球，轻轻混匀后置室温35±5分钟，观察凝集反应，试验设阴、阳性血清对照及红细胞对照，具体操作方法见表2。表2HI试验操作术式孔号12345678912稀释倍数1020408016032064012802560对照稀释液（µl）不加252525252525252550被检血清（µl）50252525252525252525弃去6单位HA抗原25252525252525252525（µl）轻轻混匀，在室温条件下静置30分钟。0.5%红血球（µl）5050505050505050505050室温条件下作用35±5分钟，观察凝集抑制反应结果判定：以阳性对照血清出现明显的血凝抑制现象开始判定，当对照阴、阳性血清的HI效价与已知效价相差不超过1个滴度时，试验结果成立。将血凝板倾斜45°角，以出现6个单位工作抗原的血凝活性完全被抑制的血清最高稀释度作为判定终点。待检血清的HI抗体效价不低于1:20判为阳性。30.5％鸡红细胞悬液的制备采取2～4只4～12月龄SPF公鸡的血液，与等量阿氏液混合，然后用0.01mol/LpH值7.2～7.6PBS洗涤3次，前两次以1500r/min离心5分钟，最后1次以同样的转速离心10分钟，将沉积的红细胞用PBS配制成0.5％红细胞（V/V）悬液，置4～8℃备用。4血清处理操作方法4.1血清200µl+1.0ml10%白陶土。4.2剧烈震荡血清/白陶土混合物，每5分钟震荡一次，共20±5分钟。4.32000r/min离心20±5分钟。4.4加入100µl5%鸡红细胞。4.5加入700µlPBS（0....