显微镜的使用与维护_百替生物VIP专享VIP免费

www.100biotech.comservice@100biotech.com实验一、显微镜的使用与维护一、显微镜的组成(仿Olympus)1.机械部分镜头转换器；粗、细准焦螺旋；载物台；刻度尺；镜臂；镜座2.光学部分(1)放大系统物镜(三个)；目镜；镜筒放大倍数=目镜倍数×物镜倍数(2)集光系统光栅；聚光镜；反光镜；开关二、使用1.开关：动作要轻、慢，不使用时要及时关闭。2.调焦距：先用粗准焦螺旋，再用细准焦螺旋。3.安指针：加拿大树胶、头发4.观察：低倍镜®高倍镜三、维护工作1.擦镜头时，用双层镜头纸对折，从中间向周围擦，不能用滤纸或其它物品代替镜头纸。每次实验完毕，镜身要用纱布擦干净。清洗液(1)乙醚：无水乙醇=85:15(冬春季)或80:20(夏秋季)(2)二甲苯2.载物台上的载玻片和盖玻片要清洁，切勿污染物镜或其它部件。3.显微镜不可上锁，如不小心会损伤粗、细准焦螺旋。4.由低倍向高倍转换时，可稍微下降载物台，以免损伤显微镜。5.存放时，将载物台降到最低点，并把镜头移开。所需材料及药品接线板、乙醚:无水乙醇=80:20、牙签、加拿大树胶、镜头纸第一大实验细胞学实验实验一、细胞固定、染色原理与方法一、固定与固定液(一)固定：将新鲜的活组织从生物体取下后，立即投入固定剂中，借助化学药品的作用，使细胞保持原有形态、结构的一种手段。www.100biotech.comservice@100biotech.com1.目的(1)迅速防止细胞死亡后的变化,防止自溶、腐败，尽量保持生长状态结构。(2)使细胞中的蛋白质、脂肪、糖、酶等成分转变为不溶性物质，以保持生前的形态。(3)使组织内各种物质成分产生不同的折光率，便于观察和鉴定。(4)使不同组织成分对染料有不同的亲和力，便于染色。(5)防止细胞过度收缩或膨胀，失去原有的形态结构。2.时期(1)有丝分裂：有丝分裂主要发生在根尖、茎生长点及幼叶等部位的分生组织，根尖取材容易，操作和鉴定方便。(2)减数分裂：选取适当大小的花蕾是观察花粉母细胞减数分裂的关键性的第一步。此时的植株形态及花蕾大小依植物的类别及品种有所不同。小麦：在植株开始挑旗，旗叶与下一叶的叶耳间距为3-4cm，花药长度大致在1-2mm左右，黄绿色时取材最好。如花药为绿色时则为时过早，花药为黄色，则已过时。一般上午8-10点为取材最佳时间。玉米：一般夏玉米在7月份取材，以上午7-8点为好。在玉米雌穗未抽出前的7-10天手摸植株上部(喇叭口下部)有松软感觉，表明雄花序即将抽出。用刀在顶叶近喇叭口处纵向划一刀，切口长10-15cm，剥出雄花序，顶端花药长3-5mm，花药尚未变黄时取材。蚕豆：从现蕾开始，上午10-11点可选取2-3mm大小的花蕾或一小段花序。蚕豆开花的次序是由下而上，由外而内。3.固定时的注意事项(1)固定液量：20倍于材料的体积，以免固定液被稀释。(2)选择合适的固定液：渗透力强的固定液既可以迅速进入组织中，又不使组织过度收缩或膨胀。(3)固定的时间要合适：与材料的大小和温度有关：材料大则时间长，材料小则时间短；温度高则时间短，温度低则时间长。经固定的材料如不及时使用，可以经过90%酒精换到70%酒精中各半小时，再换入一次70%酒精，在0-4℃冰箱内可保存半年。经过较长时间保存的材料进行观察前可以换新的固定液再处理一次，效果较好。(二)固定液固定液包括简单固定液和混合固定液两种。简单固定液就是用一种药品作为固定液，如乙醇、甲醛、冰醋酸、升汞等。简单固定液只对细胞的某种成分固定效果较好，而不能将所有的成分都保存下来。混合固定液是指两种或两种以上的化学物质的混合液，如卡诺氏固定液等。1.固定液的条件(1)迅速渗入组织,杀死原生质。在杀死的短时期中,细胞形态不致有所变化。(2)必须具有渗透力，对组织各部分的渗透力相等，可使组织内外完全固定。(3)尽可能避免使组织膨胀或收缩。(4)使细胞内的成分凝固或沉淀。(5)增加细胞内含物的折光程度，易于鉴别。(6)增加媒染作用和染色能力。(7)使组织变硬，具有一定的硬度。(8)固定以后能起到保存的作用。www.100biotech.comservice@100biotech.com(9)在凝固原生质以后，增加细胞对于各种穿透的抵抗力，不致于因以后的处理而使固定的原生质变形。2.常用的几种固定液(1)酒精：有固定、硬化和脱水的作用。可以固定...