新型化学氧化法测定胆红素试剂的研制VIP免费

江西医学检验2007年6月第25卷第3期目前,血清总胆红素和结合(直接)胆红素的测定方法主要有重氮法,化学氧化法和胆红素氧化酶法。但重氮法和改良J-G法的试剂的稳定性不佳,胆红素氧化酶法特异性好,几乎不受溶血,脂浊等的干扰,但因酶的来源,纯度,稳定性及价格等原因难于推广。钒酸氧化法的钒酸盐对仪器和环境存在潜在的污染,甚至影响豆类作物的生长[1],经过近三年使用各种化学氧化剂氧化胆红素的实验研究,我们采用多种化学氧化剂相结合,并添加相应的成份成功研制了新型化学氧化法测定总胆红素和结合·论著·新型化学氧化法测定胆红素试剂的研制袁水斌1徐光明1邓荣春2陈江平1文玲梅3中图分类号R446.11+2,Q592.1文献标识码A文章编号1008-0023(2007)03-0201-06本课题为江西省卫生厅科技计划项目作者单位:3300291、江西省肿瘤医院;2、江西省人民医院;3、南昌百特生物技术公司作者简介:袁水斌,主任技师,毕业于上海医科大学医学检验专业。[摘要]目的探讨建立一种新型化学氧化法测定血清总胆红素和直接胆红素的新方法。方法采用化学氧化法测定血清胆红素反应前后吸光度的变化,与标准品相比较,求得标本中总胆红素和直接胆红素的浓度。结果TBIL精密度试验批内高低浓度CV值为0.65%～1.56%;DBIL为0.82%～1.93%。批间TBIL为3.5%、1.71%及1.24%;DBIL批间为4.38%、2.77%及1.60%。线性范围:TBIL可达686μmol/L;DBIL可达400μmol/L;总胆回收率101.8%～107.6%,平均104.5%.DBIL回收率为99.1%～100.5%,平均为100.2%。与其他相关试剂比较TBILγ=0.9973～0.9992;DBILγ=0.9962～0.9994。溶血、脂浊和维生素C干扰试验表明:标本中Hb小于2.7g/L,TG小于5.94mmol/L。VitC小于0.1g/L,对TBIL和DBIL的测定基本无干扰。结论本试剂方法简便,结果准确、线性范围宽,试剂稳定,价格低廉。完全可用于检测临床标本。[关键词]化学氧化法;总胆红素;直接胆红素;试剂研制DevelopmentofthereagentswithnewchemicaloxidationmethodformeasuringserumbilirubinYUANShuibin,XUGuangming,DENGRongchun,etal.JiangxiProvin-cialTumorHospital,Nanchang330029,China[Abstract]ObjectiveToestablishanewchemicaloxidationmethodformeasuringserumbilirubin.MethodsChemicaloxidationmethodwasappliedfordetectingserumtotalbilirubin(TBIL)andcholebilirubin(DBIL)concentrationsaccordingtotheabsorbancechanges,andtheresultswereanalysedcomparingwiththestandardcontrols.ResultsTheintra-assayCVsofTBILwere0.65%and1.56%(n=15),withthemeanvaluesof29.35and221.7μmol/Lrespectively,whilethatofDBILwere0.82%and1.93%(n=15),withthemeanvaluesof9.70and119.76μmol/Lrespectively.Theinter-assayCVsofTBILwere3.50%,1.71%and1.24%(n=20),withthemeanvaluesof15.67,214.47and564.98μmol/Lrespectively,whilethatofDBILwere4.38%,2.77%and1.60%(n=20),withthemeanvaluesof5.18,76.12and251.83μmol/Lrespectively.Thelinearrangeswereupto686μmol/LforTBILand400μmol/LforDBILrespestively.Theaveragerecoverieswere104.5%forTBILand100.2%forDBIL.ThenitritemethodwaswellcorrelatedwithVanadatemethodandDiazomethod.Whenhemoglobinlevelinserumwasunder2.7g/L,Triglyceridesunder5.94mmol/L,orVitaminCunder0.1g/L,theresultsshowednosignificantinterferenceformeasuringbilirubin.Con-clusionsThisnewchemicaloxidizationmethodissimpleandstable,anditcanbeusedinroutinedetectionsofserumtotalTBILandDBIL.[Keywords]Chemicaloxidationmethod;Totalbilirubin;Cholebilirubin;Reagentde-velopment201··JiangxiJ.MedLabSci.June2007,Vol25,No3胆红素的试剂,现报告如下。材料与方法1试剂1.1总胆红素试剂试剂R1:100mmol/L柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液,pH2.9,加有二甲亚砜、聚乙烯吡咯烷酮、非离子表面活性剂、EDTA-Na2和有机防腐剂。试剂R2:含亚硝酸钠,少量钒酸钠和碳酸钠等。1.2直接(结合)胆红素试剂试剂R1:100mmol/L邻苯二甲酸氢钾缓冲液,pH5.0,聚乙烯吡咯烷酮、EDTA-Na2和有机防腐剂。试剂R2:含亚硝酸钠,少量碳酸钠等。1.3对照试...