课题3-血红蛋白的提取和分离VIP免费

选修一生物技术实践专题5DNA和蛋白质技术课题3血红蛋白的提取和分离教学目标重点难点问题探讨教学过程知识结构教学反馈课后习题教学参考本课题学习目标本课题学习目标体验从复杂体系中提取生物大分子的基本过程和方法，并了解色谱法、电泳法等分离生物大分子的基本原理。11、主要概念：、主要概念：①凝胶色谱法②电泳法③缓冲溶液④它们在血红蛋白的提取中分别起到什么作用。2.2.主要原理：主要原理：①凝胶色谱法分离蛋白质的原理②电泳法分离样品的原理③缓冲溶液的组成和作用机理本课题学习重点和难本课题学习重点和难点点体验从复杂体系中提取生物大分子的基本过程和方法，并了解色谱法、电泳法等分离生物大分子的基本原理。33、课题重点：、课题重点：凝胶色谱法的原理和方法44、、课题难点：课题难点：①样品的预处理②色谱柱填料的处理和色谱柱的装填。20032003年年44月月1414日宣布人类基因组序列图完成，日宣布人类基因组序列图完成，这标志着进入了后基因组和蛋白质组时代这标志着进入了后基因组和蛋白质组时代人类基因组：人类基因组：指指DNADNA分子所携带的全部遗传信息分子所携带的全部遗传信息蛋白质组：蛋白质组：生物个体表达的蛋白质分子的总和。主要生物个体表达的蛋白质分子的总和。主要是对蛋白质功能的研究。是对蛋白质功能的研究。血血液液血浆血浆水分水分固体物质：固体物质：血浆蛋白、血浆蛋白、无机盐、磷脂、葡萄糖等无机盐、磷脂、葡萄糖等血细血细胞胞白细胞白细胞血小板血小板红细胞红细胞（最多）（最多）血红蛋白血红蛋白（（9090％）％）两个两个αα－肽链－肽链两个两个ββ一肽一肽链链四个亚铁红素基团四个亚铁红素基团2.2.提问：提问：血液有哪些成分？血液有哪些成分？1.1.提问：提问：用鸡的红细胞提取用鸡的红细胞提取DNADNA，用人的红细胞，用人的红细胞提取血红蛋白的原因是什么？提取血红蛋白的原因是什么？鸡的红细胞具有细胞核，含有鸡的红细胞具有细胞核，含有DNADNA，便于进行，便于进行DNADNA的提取；人的红细胞无细胞核，结构简单，血红的提取；人的红细胞无细胞核，结构简单，血红蛋白含量丰富，便于提取血红蛋白。蛋白含量丰富，便于提取血红蛋白。血红蛋白血红蛋白血红蛋白血红蛋白两个两个αα－肽链－肽链两个两个ββ一肽一肽链链四个亚铁红素基团四个亚铁红素基团每个肽链环绕一个亚铁血红素基团，此基团可携带一分子氧或一分子二氧化碳，血红蛋白因含有血红素而呈红色。血红蛋白的特点：血红蛋白的特点：1.1.分离生物大分子的基本思路：分离生物大分子的基本思路：选用一定的物理或化学的方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子。2.2.蛋白质分离和提取的原理：蛋白质分离和提取的原理：根据蛋白质各种特性的差异，如分子的形状和大小、所带电荷的性质和多少、溶解度、吸附性质和对其他分子的亲和力等等，可以用来分离不同种类的蛋白质。一、血红蛋白的提取和分离一、血红蛋白的提取和分离3.3.高温灭菌和酒精灭菌的结果：高温灭菌和酒精灭菌的结果：使微生物的蛋白质发生变性、蛋白质的空间结构被破坏。（一）凝胶色谱法（（一）凝胶色谱法（分配色谱法分配色谱法））2.2.凝胶：凝胶：大多数凝胶是由多糖类化合物（如葡聚糖或琼脂糖）构成的多孔小球体，内部有许多贯穿的通道。根据被分离物质的蛋白质相对分子质量的大小，利用具有网状结构的凝胶的分子筛作用，来进行分离。1.1.概念：概念：3.3.凝胶色谱法的原理凝胶色谱法的原理——分子筛效应：分子筛效应：①当相对分子量不同的蛋白质通过凝胶时，相对分子量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程较长，移动速度较慢;②而相对分子量较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外部移动，路程较短，移动速度较快。相对分子质量不同的蛋白质分子因此得以分离。③依据的特性是：依据的特性是：蛋白质分子量的大小。蛋白质分子量的大小。4.4.凝胶色谱法凝胶色谱法分离蛋白质的原理和的原理和具体过程具体过程凝胶色谱法分离蛋白质过程的动画演示凝胶色谱法分离蛋白质过程的动画演示（二）缓冲溶液（二）缓冲溶液1.1.概念概念::在一定的范围内，凡是能够...