血红蛋白的提取和分离导学案首次由我国科学家领导的人类肝脏蛋白质组计划，取得了阶段性成果。已经成功测定出6788个高可信度的中国成人肝脏蛋白质；发现了包含1000余个“蛋白质-蛋白质”相互作用的网络图；建立了2000余株蛋白质抗体。同学们，肝脏中的蛋白质成千上万，这些蛋白质是如何被分离出来的呢？它需要那些基本技术与方法呢？问题探究一、蛋白质分离的原理1、阅读教材P64课题背景，思考了解①、红细胞的特点是什么？②、根据红细胞的特点推测蛋白质的作用是什么？2、阅读P64-66基础知识，思考并掌握①、分离蛋白质依据的原理是什么?方法是什么？②、凝胶色谱法分离蛋白质的概念是什么？原理是什么？材料是什么？③、缓冲溶液的含义是什么？配制是什么？作用是什么？④、电泳的含义是什么？分离样品的原理是什么？常用方法有哪些？⑤、测定蛋白质相对分子质量大小通常使用哪种电泳方法？迁移速率主要取决于蛋白质的什么特性？二、血红蛋白的分离与提取1、阅读P66-69实验操作，思考并掌握1、蛋白质的分离和提取一般布骤是什么？2、血红蛋白的组成是什么？为什么呈现红色？3、防止新鲜血样凝固一般可以加什么？4、红细胞洗涤的目的是什么？离心时注意什么？加生理盐水的作用是什么？5、血红蛋白的释放需要加入什么试剂？原理是什么？6、分离血红蛋白离心时需注意什么？从上到下分为哪几层？7、透析的原理是什么？目的是什么？作用又是什么？透析袋内外分别装的是什么溶液？2、纯化蛋白质的方法是什么？目的是什么？（1）凝胶色谱柱的制作步骤有哪些？（2）凝胶色谱柱的装填步骤有哪些？需要注意什么？（3）样品的家入和洗脱步骤有哪些？需要注意什么？如何判断色谱柱制作成功？3、蛋白质纯度的鉴定方法是什么？知识巩固1、用凝胶色谱法分离蛋白质时，分子量大的蛋白质（）A．路程较长，移动速度较慢B．路程较长，移动速度较快C．路程较短，移动速度较慢D．路程较短，移动速度较快2、利用凝胶色谱法，什么样的蛋白质先洗脱出来（）A.相对分子质量大的B.溶解度高的C.相对分子量小的D.所代电荷多的3、蛋白质提取和分离分为哪几步（）A.样品处理、凝胶色谱操作、SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳B.样品处理、凝胶色谱操作、纯化C.样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定第1页共3页D.样品处理、纯化、粗分离、纯度鉴定4、凝胶色谱法是根据（）分离蛋白质的有效方法。A分子的大小B相对分子质量的大小C带电荷的多少D溶解度5、缓冲液的作用是：在一定范围内，抵制外界的影响来维持（）基本不变。A温度BpHC渗透压D氧气浓度6、电泳是指带电粒子在电场的作用下向着与其所带电荷（）的电极移动。A相同B相反C相对D相向7、哺乳动物和人的成熟的红细胞中的（）与氧气的运输有关。A血红蛋白B肌红蛋白C肌动蛋白D肌球蛋白8、血液由血浆和各种血细胞组成，其中（）的含量最多。A白细胞B血小板C红细胞D淋巴细胞9、为防止血液凝固，在采血容器中要预先加入抗凝血剂（）。A.NaClB.甲苯C.蒸馏水D.柠檬酸钠10、将搅拌好的混合液转移到离心管中，离心后，可以明显看到试管中的溶液分为4层，其中第3层是（）A.无色透明的甲苯层B.脂溶性物质的沉淀层C.血红蛋白的水溶液D.其他杂质的暗红色沉淀物11、红细胞含有大量的血红蛋白，红细胞的机能主要是由血红蛋白完成，血红蛋白的主要功能是携带氧气或二氧化碳，我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验，来提取和分离血红蛋白，请回答下列有关问题：（1）血红蛋白提取和分离的程度可分为四步：______、______、______和______。（2）实验前取新鲜的血液，要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠，取血回来，马上进行离心，收集血红蛋白溶液。①加入柠檬酸钠的目的是__________________。②以上所述的过程即是样品处理，它包括______、______、收集血红蛋白溶液。（3）收集的血红蛋白溶液在透析袋中可以经过透析，这就是样品的粗分离。①透析的目的是__________________。②透析的原理是______________________________。（4）然后通过凝胶色谱法将样品进一步纯化，最后经SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。①样品纯化的目的是______________________________。...
