萘普生钠工作对照品标定方案一、概述：标准品、对照品系指用于药品鉴别、检查、含量测定的标准物质，即药品标准中使用的具有确定的特性或量值，用于对供试药品赋值、定性、评价测定方法或校准仪器设备的物质，其中标准品系指用于生物检定、抗生素或生化药品中含量或效价测定的标准物质。对照品含量标定方法需要至少两种经方法学验证方法进行标定。并采用两种以上不同分离机理或不同色谱条件并经验证的色谱方法相互验证比较，同时采用二极管阵列检测器检测HPLC法的色谱峰纯度（如果无合适的另一种方法，就采用不同仪器分别进行测定），而后根据测定结果经统计分析确定对照品（标准品）的纯度。色谱法确定纯度后扣除有关物质、炽灼残渣、水分和残留溶剂等后的理论含量确定为标准品含量。对于组份单一、纯度较高的药物，对照品（标准品）标定方法宜首选可进行等当量换算、精密度高、操作简便快速的容量法。可根据药物分子中所具有的官能团及其化学性质，选用不同的容量分析方法，但应符合如下条件：（1）反应按一个方向进行完全；（2）反应迅速，必要时可通过加热或加入催化剂等方法提高反应速度；（3）共存物不得干扰主药反应，或能用适当方法消除；（4）确定等当点的方法要简单、灵敏；（5）标化滴定液所用基准物质易得，并符合纯度高、组成恒定且与化学式符合、性质稳定（标定时不发生副反应）等要求。如该药物没有可进行等当量换算并符合要求的容量法时，可采用反复纯化的原料，色谱法确定纯度后扣除有关物质、炽灼残渣、水分和挥发溶剂等后的理论含量确定为标准品含量，以此为基准进行对照品（标准品）的换代和量值传递。二、对照品含量技术要求：1．对照品含量要求：（必须高于原料纯度）（1）主成分对照品含量要求：含量一般不低于99.5%（折干后）。（2）杂质对照品含量要求：含量一般不低于95.0%（折干后）2．色谱法测定纯度时要求（1）供试品浓度要求：分析方法有关物质项下浓度。（2）检测波长选择：首选有关物质项下条件，同时结合DAD结果查看多个波长项下是否有未检出杂质。（3）流动相选择：首选有关物质项下条件，如果出峰时间过短（小于5min）可适当调整色谱条件，以延长其保留时间考查。三、萘普生钠一级标准品信息中国食品药品检定院无萘普生钠供HPLC用工作标准品，只有供UV用工作标准品，无法用于HPLC法。四、方案设计由于中国食品药品检定院无萘普生钠供HPLC用工作标准品，需要按一级标准品标定程序对原料药进行标定，萘普生钠已有国家标准，（中国药典2015版第二部收录）该批原料来源合法，资质文件齐全，不需要进行结构确认，按照萘普生钠质量标准草案进行全检，符合要求，取适当原料进行标定，以EP8.0收录的萘普生钠有关物质方法进行标定，以中国药典2015版第二部收录的萘普生钠含量方法（容量法）进行确认。五、标定流程5.1根据质量标准草案对待标定萘普生钠进行全检，并出具全检报告。5.2标定EP8.0收录的萘普生钠有关物质方法进行标定，以中国药典2015版第二部收录的萘普生钠含量方法（容量法）进行确认。5.3色谱纯度HPLC法5.3.1方法见表一表一萘普生钠有关物质方法流动相1.36g/L/1磷酸二氢钾（PH2.0）-乙腈（58：42）色谱柱C18100*4.6mm5um样品浓度0.6mg/ml进样量20u1柱温50°C流速1.5m1/min检测波长230nm供试品溶液配制：精密称取萘普生钠12mg，置于20ml量瓶中，流动相定容。自身对照溶液配制：精密量取供试品溶液1ml置于50ml量瓶中，流动相定容，精密量取1ml，20ml量瓶中流动相定容。分离度溶液:分别精密称取萘普生钠杂质K、萘普生钠杂质N、萘普生钠杂质L6mg,置于10ml量瓶中，乙腈溶解定容，精密量取1ml置于50ml量瓶中，精密加入1ml供试品溶液，流动相定容，精密量取1ml置于20ml量瓶中，流动相定容。5.3.2标定⑴实验员A按照萘普生钠有关物质方法配制分离度溶液、供试品溶液3份及其自身对照品溶液、分别注入液相色谱仪A测定，记录色谱图，以主成分自身对照法计算各杂质含量，API纯度为百分百减去所有杂质。⑵实验员B按照萘普生钠有关物质方法配制分离度溶液、供试品溶液3份及其自身对照品溶液、分别注入液相色谱仪A测定，记录色谱图，以主成分自身对照法计...
