第2节基因工程及其应用1.简述基因工程的基本原理。2.举例说出基因工程在农业、医药领域的应用。3.关注转基因生物和转基因食品的安全性。转基因西红柿转基因驱蚊草转基因超级小鼠转基因猪2.原理:3.操作水平:基因重组DNA分子水平1.概念:按照人们的意愿,把一种生物的某种基因提取出来,加以修饰改造,然后放到另一种生物的细胞里,定向地改造生物的遗传性状,又叫做基因拼接技术或DNA重组技术。一、基因工程的原理4.优点:①克服了远缘杂交不亲和的障碍;②周期短;③目的性强。(3)作用结果:得到具有平末端或黏性末端的DNA片段。(2)特性:一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并在特定的切点上切割DNA分子。(1)存在场所:主要是存在于微生物细胞中。二、基因工程的操作工具1.基因的“剪刀”──限制性核酸内切酶例如,大肠杆菌中的一种叫做EcoRI的限制酶,能够专一识别GAATTC的序列,并在特定的切点上切割DNA分子。2.基因的“针线”──DNA连接酶连接酶的作用是:将互补配对的两个黏性末端连接起来,使之成为一个完整的DNA分子。(1)作用:将外源基因导入受体细胞。(2)常用种类:质粒、噬菌体和动植物病毒。。3.基因的运输工具——运载体(3)运载体必须具备的三个条件:①在宿主细胞中能保存下来并能大量复制。②有多个限制酶切点,以便与外源基因连接。③具有标记基因,以便进行筛选。最常用的运载体——质粒分布:存在于许多细菌以及酵母菌等生物的细胞中。最常用的质粒是大肠杆菌的质粒。本质:细胞染色体(或拟核)外能自主复制的小型环状DNA分子。三、基因工程的步骤1.基因工程与作物育种四、基因工程的应用转基因抗虫棉与普通棉对照抗除草剂的玉米、大豆2.基因工程与药物研制方法特点胰岛素传统方法直接从生物体的组织、细胞或血液中提取产量低、价格昂贵4g~5g/100kg胰腺基因工程“工程菌”发酵工业化生产高质量低成本100g/2000L大肠杆菌培养液生产基因工程药品(如:胰岛素)基因工程做成的“超级细菌”能吞食和分解多种污染环境的物质。3.环境保护通常一种细菌只能分解石油中的一种烃类,用基因工程培育成功的“超级细菌”却能分解石油中的多种烃类化合物。有的还能吞食转化汞、镉等重金属,分解DDT等毒害物质。利用基因工程培育的“指示生物”能十分灵敏地反映环境污染的情况,却不易因环境污染而大量死亡,甚至还可以吸收和转化污染物。⒈要使目的基因与对应的运载体重组,所需的两种酶是()①限制酶②连接酶③解旋酶④还原酶A.①②B.③④C.①④D.②③2.基因工程的正确操作步骤是()①使目的基因与运载体结合②将目的基因导入受体细胞③检测目的基因的表达是否符合特定性状的要求④提取目的基因A.③②④①B.②④①③C.④①②③D.③④①②AC3.下列属于运载体所必须具有的条件是()①具有某些标志基因②具有环状的DNA分子③能够在宿主细胞中复制④具有多个限制性内切酶A.①②B.③④C.①③D.②④C4.人们常选用的细菌质粒分子往往带有一个抗生素抗性基因,该抗性基因的主要作用是()A.提高受体细胞在自然环境中的耐药性B.增加质粒分子的分子量C.有利于对目的基因是否导入受体细胞进行检测D.便于与外源基因连接C5.1993年,我国科学工作者培育成功抗棉铃虫的转基因抗虫棉,其抗虫基因来源于()A.普通棉花的基因突变B.棉铃虫变异形成的致死基因C.寄生在棉铃虫体内的线虫D.苏云金芽孢杆菌中的抗虫基因D6.科学家将使啤酒产生丰富泡沫的LTP1基因植入啤酒酵母菌中,使其产生LTP1蛋白,酿出泡沫丰富的啤酒,具体的操作过程如图所示。(注:限制性核酸内切酶Ⅰ的识别序列和切点是-G↓GATCC-,限制性核酸内切酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—)(1)图中所示的基因工程操作过程的A和C分别是_______、_______。(2)由图中可以看出所用的运载体B是_______。(3)请画出LTP1基因被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端。(4)请画出B被限制酶Ⅱ切割后所形成的黏性末端。(5)分析LTP1基因和B所形成的黏性末端能否黏合?_____。假设能的话,还必须需要的一种工具酶是_______。【解析】(1)图中A过程,是提取目的基因,C过程是将目的基因与运载体的结合体导入到受体细胞中...