绵竹中学绵竹中学基因工程基因工程基因工程的步骤目的基因的检测和表达4提取目的基因1目的基因和运载体结合2将目的基因导入受体细胞3提取目的基因•直接分离法(多为原核)1.反转录法2.根据已知氨基酸序列合成DNA最早的基因工程•人工合成法(多为真核,可为原核)鸟枪法(散弹射击法)不管是哪种方法得到目的基因,为了大量复制,我们可以采取PCR技术在短时间内扩增目的基因。不管是哪种方法得到目的基因,为了大量复制,我们可以采取PCR技术在短时间内扩增目的基因。人工合成基因的原因目的基因运载体目的基因与运载体结合构建重组DNA•多个限制酶切点•在宿主细胞中复制并稳定保存•具有某些标记基因要求要求要求11满足人类某一要求的基因要能方便地在受体细胞中检测到有没有目的基因。要求要求11要求要求22要能很好地将目的基因导入受体细胞内。受体细胞是动物的细胞,运载体最好选病毒。如果不是,可以选择质粒。受体细胞是动物的细胞,运载体最好选病毒。如果不是,可以选择质粒。目的基因与运载体结合粘性末端+往往需要同一种限制性内切酶来处理质粒及其上的标记基因目的基因重组质粒需要DNA连接酶来处理+将目的基因导入受体细胞因受体细胞的来源不同,这之后采取的手段也不尽相同,在确认目的基因检测和表达正常后:①直接发酵;②进行植物组织培养;③动物细胞培养及胚胎移殖得转基因动物,从而最终获得产品;④进一步导入受体细胞注意受体细胞•接受重组DNA的细胞可以是体细胞,也可以是受精卵。可在生物体外,也可在植物体内直接操作可以是体细胞,也可以是受精卵。可在生物体外,也可在植物体内直接操作细真菌细胞动物细胞植物细胞目的基因的检测和表达目的基因的检测目的基因的目的基因的表达成功•需要的性状或产品•受体细胞内是否有标记基因•转录和翻译目的基因的检测和表达基因工程的别名基因工程的别名操作环境操作环境操作对象操作对象操作水平操作水平基本过程基本过程目的目的变异实质变异实质基因拼接技术或基因拼接技术或DNADNA重组技术重组技术生物体外生物体外基因基因DNADNA分子水平分子水平定向改造生物的遗传性状定向改造生物的遗传性状(形成人类需要的基因产物)(形成人类需要的基因产物)剪切剪切→→拼接拼接→→导入导入→→表达表达基因重组基因重组绵竹中学绵竹中学谢谢您!