《系统》P111一、基因工程的概念辨析别名____________操作环境生物体外操作对象_____操作水平____________优点克服的障碍，生物性状结果创造出人类需要的新的_________和_________DNA重组技术或基因拼接技术基因DNA分子水平生物类型生物产品（基因重组）远缘杂交不亲和定向改造二、DNA重组技术的基本工具1.限制性核酸内切酶(也称“限制酶”):(1)来源:主要来自于_________。(2)特点:具有专一性。①识别双链DNA分子的某种_______________。②切割特定核苷酸序列中的特定位点。(3)作用:断开每一条链中_________的两个核苷酸之间的___________。(4)结果:产生_________或_______。原核生物特定核苷酸序列特定部位磷酸二酯键磷酸二酯键黏性末端平末端《系统》p1122.DNA连接酶:(1)作用:将__________“缝合”起来,恢复被_______切开的两个核苷酸之间的___________。(2)种类:种类来源特点________DNA连接酶__________“”只能缝合具有_____________的双链DNA片段T4DNA连接酶T4噬菌体“”既可以缝合双链DNA片段互补的_________,“”又可以缝合双链DNA片段的_______双链DNA片段限制酶磷酸二酯键E·coli互补黏性末端黏性末端平末端杆菌大肠限制酶、DNA连接酶、聚合酶与解旋酶的比较:(1)相同点:都是作用于DNA分子中的化学键。(2)不同点:作用部位不同,前三者作用于磷酸二酯键,后者作用于氢键。关注《系统》P114（一）3.基因进入受体细胞的载体:DNA分子λ噬菌体一个至多个限制酶切割位点，供外源基因插入标记基因，供重组DNA的鉴定和选择携带外源DNA片段进入受体细胞三、基因工程的基本操作程序的获取↓_____________的构建↓将_________导入；↓目的基因的___________基因表达载体目的基因检测与鉴定为什么要构建载体？怎样构建载体？将目的基因导入植物细胞方法：将目的基因导入动物细胞方法：将目的基因导入微生物细胞方法：检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因检测目的基因是否转录出mRNA检测目的基因是否翻译出蛋白质目的基因受体细胞从基因文库中获取目的基因利用PCR技术扩增目的基因人工合成（核心）进行个体生物学水平鉴定——生物性状判断基因表达载体的构建1.基因表达载体的功能:通过基因表达载体将________导入受体细胞。2、目的：使其在受体细胞中稳定存在，并可遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。3.基因表达载体组成:启动子终止子——终止转录标记目的基因——鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含目的基因的细胞筛选出来。——RNA聚合酶识别和结合的部位【易错·警示】6.启动子、终止子：(1)启动子(DNA片段)≠起始密码子(位于RNA上)。(2)终止子(DNA片段)≠终止密码子(位于RNA上)。4.构建方法:【易错·警示】3.使用限制酶的注意点：(1)一般用同一种限制酶切割载体和获取目的基因。(2)不同的限制酶也能切割出相同的黏性末端。(2)利用PCR技术扩增目的基因:①含义:是一项在生物体外_____________的技术。②原理:____________。③条件:_____、DNA模板、______、四种脱氧核苷酸。复制DNA片段DNA双链复制引物④过程:目的基因DNA受热_____后解链为单链↓_____与单链相应互补序列结合↓在__________作用下进行_____↓重复循环多次变性引物Taq酶延伸DNA聚合酶变性复性延伸↓↓dNTP3.转化方法:(1)导入植物细胞:方法_____________：双子叶植物或_____植物基因枪法：___________花粉管通道法农杆菌转化法裸子单子叶植物方法：_____________显微注射技术(导入受精卵)(2)导入动物细胞(3)导入微生物细胞方法:a.用____处理细胞,使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态(这种细胞称为___________)。b.感受态细胞吸收____________________。重组表达载体DNA分子Ca2+感受态细胞(3)目的基因表达与鉴定的“四个层面”染色体DNA上标记的DNA分子，即探针，是用带有放射性同位素的有特定序列的单链DNA。它能与自己互补配对的序列结合。四、基因工程的应用1.基因工程的应用(1)动物基因工程：用于提高动物从而提高产品产量；用于改善畜产品品质；用转基因动物生产；用转基因动物作器官移植的等。(2)植物基因工程：培育抗虫转基因植物、抗病转基因植物和转基因植物；利用转...
