临床模拟标本细菌学检验的实验设计书1.标本分析标本中可能的正常菌群:正常情况下肠道中有多种细菌寄生,包括大量的厌氧菌、肠球菌、大肠埃希菌、肠杆菌、变形杆菌、粪产碱杆菌等。标本中可能存在的病原菌:①细菌性:吸收不良性腹泻,包括致病性大肠埃希菌等;产毒素性腹泻,包括霍乱弧菌、肠毒素型大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、艰难梭菌、变形杆菌、气单胞菌属、蜡样芽胞杆菌等;侵袭性腹泻,包括志贺菌、肠致病型大肠埃希菌、肠侵袭型大肠埃希菌、肠出血型大肠埃希菌、空肠弯曲菌、小肠结肠炎耶尔森菌等;食物中毒,包括沙门菌、金黄色葡萄球菌、副溶血性弧菌、乙型溶血链球菌和肉毒梭菌等;伪膜性肠炎,包括艰难梭菌或金黄色葡萄球菌;慢性腹泻,可能由结核杆菌引起;继发性肠道感染:铜绿假单胞菌、非结核分枝杆菌等。②真菌性:念珠菌、毛霉菌等。③病毒性:轮状病毒等。2. 检验思路图 1-1 粪便标本细菌学检验程序3.拟采用的实验方法及预期结果(1)显微镜检查(仅在怀疑为霍乱弧菌、艰难梭菌、结核分枝杆菌感染等情况下进行)①不染色标本检查:用生理盐水或卢戈氏碘液或 0.1%亚甲蓝染液与等量的粪便标本混合均匀涂于载玻片上,盖上盖玻片用相差显微镜或暗视野显微镜高倍镜镜检。A.若标本呈米泔样或洗肉水样,镜检发现逗点状或弯曲状的弧菌,呈流星样穿梭,运动活泼,提示霍乱弧菌感染。此时加入 O 群或 O139 群霍乱弧菌多价诊断血清,显微镜下观察与不加诊断血清比较,若大于 80%的细菌停止运动或运动明显减弱,判断为制动试验阳性,可初步报告为“疑似 0 群或 0139 群霍乱弧菌”B•若发现呈 S 形、螺旋形并快速、拧塞样或投镖样运动的细菌,提示为弯曲菌。C•若高倍镜观察发现有无光亮的卵圆形抱子或假菌丝可初步报告酵母样真菌感染。②染色检查:如细菌染色呈现下列典型形态时,对诊断具有提示作用。A.取新鲜米泔样类便标本涂片 2 张,用乙醇或甲醇固定,分别进行革兰染色和 1:10 稀释苯酚复红染色,油镜观察呈鱼群状排列的杆状或弧形红色革兰阴性杆菌。提示为霍乱弧菌。B•粪便做革兰染色,镜检发现细小、长而弯曲,呈 S 形或螺旋形、海鸥状的革兰阴性弧菌,可初步报告“疑似空肠弯曲菌”。C•取水样便涂片,革兰染色,若发现大量散在或成堆(葡萄状)排列的革兰阳性球菌同时伴随革兰阴性杆菌明显减少,疑为引起伪膜性肠炎的葡萄球菌。D. 抗生素相关性腹泻的主要病原菌,大便呈黄绿色糊状便或暗绿色海水样便,黏液...