基因工程一、基因工程的概念基因工程是指按照人们的愿望,进行严格的设计,并通过体外DNA 重组和转基因等技术,赋予生物以新的遗传特性,从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品
由于基因工程是在DNA 分子水平上进行设计和施工的额,因此又叫做DNA 重组技术
基因工程的别名基因拼接技术或DNA 重组技术操作环境生物体外操作对象基因操作水平DNA 分子水平基本过程剪切→拼接→导入→表达实质(原理)基因重组结果改造的方向克服远缘杂交不亲和的障碍,定向改造生物的遗传特性二、基因工程的基本工具1、限制性核酸内切酶-----“分子手术刀”2、DNA 连接酶 ----- “分子缝合针”3、基因进入受体细胞的载体----- “分子运输车”1 .“分子手术刀”——限制性核酸内切酶(限制酶)(1 )存在:主要存在于原核生物中
(2 )特性:特异性,一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并且能在特定的切点上切割DNA分子
(3 )切割部位:磷酸二酯键(4 ) 作用:能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开
(5)识别序列的特点:(6 ) 切割后末端的种类:DNA分子经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式——黏性末端和平末端
当限制酶在它识别序列的中轴线两侧将DNA的两条链分别切开时,产生的是黏性末端,而当限制酶在它识别序列的中轴线处切开时,产生的则是平末端
2.“分子缝合针”—— DNA 连接酶(1)作用:将限制酶切割下来的DNA 片段拼接成DNA 分子
(2)类型相同点:都连接磷酸二酯键3.“分子运输车 ”——载体(1)载体具备的条件:①能在受体细胞中复制并稳定保存
②具有一个至多个限制酶切点,供外源DNA 片段插入
③具有标记基因,供重组DNA 的鉴定和选择
(2)最常用的载体是质粒,它是一种裸露的、结构简单的、独立