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基因工程知识点超全VIP免费

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基因工程一、基因工程的概念基因工程是指按照人们的愿望,进行严格的设计,并通过体外DNA 重组和转基因等技术,赋予生物以新的遗传特性,从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在DNA 分子水平上进行设计和施工的额,因此又叫做DNA 重组技术。基因工程的别名基因拼接技术或DNA 重组技术操作环境生物体外操作对象基因操作水平DNA 分子水平基本过程剪切→拼接→导入→表达实质(原理)基因重组结果改造的方向克服远缘杂交不亲和的障碍,定向改造生物的遗传特性二、基因工程的基本工具1、限制性核酸内切酶-----“分子手术刀”2、DNA 连接酶 ----- “分子缝合针”3、基因进入受体细胞的载体----- “分子运输车”1 .“分子手术刀”——限制性核酸内切酶(限制酶)(1 )存在:主要存在于原核生物中。(2 )特性:特异性,一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并且能在特定的切点上切割DNA分子。(3 )切割部位:磷酸二酯键(4 ) 作用:能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。(5)识别序列的特点:(6 ) 切割后末端的种类:DNA分子经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式——黏性末端和平末端。当限制酶在它识别序列的中轴线两侧将DNA的两条链分别切开时,产生的是黏性末端,而当限制酶在它识别序列的中轴线处切开时,产生的则是平末端。2.“分子缝合针”—— DNA 连接酶(1)作用:将限制酶切割下来的DNA 片段拼接成DNA 分子。(2)类型相同点:都连接磷酸二酯键3.“分子运输车 ”——载体(1)载体具备的条件:①能在受体细胞中复制并稳定保存。②具有一个至多个限制酶切点,供外源DNA 片段插入。③具有标记基因,供重组DNA 的鉴定和选择。(2)最常用的载体是质粒,它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌拟核之外,并具有自我复制能力的双链环状DNA 分子。(3)其他载体: λ 噬菌体的衍生物、动植物病毒。(4)载体的作用 : ①作为运载工具,将目的基因送入受体细胞。②在受体细胞内对目的基因进行大量复制。【解题技巧】(1)限制酶是一类酶,而不是一种酶。(2)限制酶的成分为蛋白质,其作用的发挥需要适宜的理化条件,高温、强酸或强碱均易使之变性失活。(3)在切割目的基因和载体时要求用同一种限制酶,目的是产生相同的黏性末端。(4)获取一个目的基因需限制酶剪切两次,共产生4 个黏性末端或平末端。(5)不同 ...

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