学习文档 仅供参考 基因工程 一、基因工程的概念 基因工程是指按照人们的愿望,进行严格的设计,并通过体外DNA 重组和转基因等技术,赋予生物以新的遗传特性,从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在DNA 分子水平上进行设计和施工的额,因此又叫做DNA 重组技术。 基因工程的别名 基因拼接技术或DNA 重组技术 操作环境 生物体外 操作对象 基因 操作水平 DNA 分子水平 基本过程 剪切→ 拼接→ 导入→ 表达 实质〔原理〕 基因重组 结果改造的方向 克服远缘杂交不亲和的障碍,定向改造生物的遗传特性 二、基因工程的基本工具 1、限制性核酸内切酶-----“分子手术刀” 2、DNA 连接酶-----“分子缝合针” 3、基因进入受体细胞的载体-----“分子运输车” 1 .“ 分子手术刀”——限制性核酸内切酶(限制酶) (1 )存在:主要存在于原核生物 中。 (2 )特性:特异性,一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并且能在特定的切点上切割DNA分子。 (3 )切割部位:磷酸二酯键 (4 )作用:能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。 学习文档 仅供参考 〔5〕识别序列的特点: (6 )切割后末端的种类:DNA分子经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式——黏性末端和平末端。当限制酶在它识别序列的中轴线两侧将DNA的两条链分别切开时,产生的是黏性末端,而当限制酶在它识别序列的中轴线处切开时,产生的则是平末端。 学习文档 仅供参考 2.“分子缝合针”——DNA 连接酶 〔1〕作用:将限制酶切割下来的DNA 片段拼接成DNA 分子。 〔2〕类型 相同点:都连接磷酸二酯键 3.“分子运输车” ——载体 (1)载体具备的条件: ①能在受体细胞中复制并稳定保存。 ②具有一个至多个限制酶切点,供外源DNA 片段插入。 ③具有标记基因,供重组DNA 的鉴定和选择。 (2)最常用的载体是质粒,它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌拟核之外,并具有自我复制能力的双链环状DNA 分子。 (3)其他载体:λ噬菌体的衍生物、动植物病毒。 (4)载体的作用: ①作为运载工具,将目的基因送入受体细胞。 ②在受体细胞内对目的基因进行大量复制。 【解题技巧】 (1)限制酶是一类酶,而不是一种酶。 (2)限制酶的成分为蛋白质,其作用的发挥需要适宜的理化条件,高温、强酸或强碱均易使之变性失活。 (3)在...