SDS－PAGE 测定蛋白质相对分子质量 一 、前言 聚丙烯酰胺凝胶电泳 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 ， 简 称 PAGE， 是 以 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 作 为 支持 介 质 的 一 种 常 用 电 泳 技 术 。 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 由 单 体 丙 烯 酰 胺 和 甲 叉双 丙 烯 酰 胺 聚 合 而 成 ， 聚 合 过 程 由 自 由 基 催 化 完 成 。 催 化 聚 合 的 常 用方 法 有 两 种 :化 学 聚 合 法 和 光 聚 合 法 。 化 学 聚 合 以 过 硫 酸 铵 (APS)为 催化 剂 ， 以 四 甲 基 乙 二 胺 (TEMED)为 加 速 剂 。 在 聚 合 过 程 中 ， TEMED催 化 过 硫 酸 铵 产 生 自 由 基 ， 后 者 引 发 丙 烯 酰 胺 单 体 聚 合 ， 同 时 甲 叉 双丙 烯 酰 胺 与 丙 烯 酰 胺 链 间 产 生 甲 叉 键 交 联 ， 从 而 形 成 三 维 网 状 结 构 。 PAGE 根 据 其 有 无 浓 缩 效 应 ，分 为 连 续 系 统 和 不 连 续 系 统 两 大 类 ，连 续 系 统 电 泳 体 系 中 缓 冲 液 pH 值 及 凝 胶 浓 度 相 同 ， 带 电 颗 粒 在 电 场作 用 下 ， 主 要 靠 电 荷 和 分 子 筛 效 应 。 不 连 续 系 统 中 由 于 缓 冲 液 离 子 成分 ， pH， 凝 胶 浓 度 及 电 位 梯 度 的 不 连 续 性 ， 带 电 颗 粒 在 电 场 中 泳 动不 仅 有 电 荷 效 应 ， 分 子 筛 效 应 ， 还 具 有 浓 缩 效 应 ， 因 而 其 分 离 条 带 清晰 度 及 分 辨 率 均 较 前 者 佳 。 不 连 续 体 系 由 电 极 缓 冲 液 、浓 缩 胶 及 分 离胶 所组成 。 浓 缩 胶 是 由AP 催 化 聚 合 而 成 的 大 孔胶 ， 凝 胶 缓 冲 液 为pH6.7 的 Tris-HCl。 分 离 胶 是 由 AP 催 化 聚 合 而 成 的 小孔胶 ， 凝 胶 缓冲 液 为pH8.9 Tris-HCl。 电 极 缓 冲 液 是 pH8.3 Tris-甘氨酸 缓 冲 液 。 2种 孔径的 凝 胶 、2 种 缓 冲 体 系 、3 种pH 值 使不 连 续 体 系 形 成 了凝 胶孔径、pH 值 、缓 冲 液 离 子 成 分 的 不 连 续 性 ， 这...
