等温核酸扩增技术进展 等温核酸扩增技术已广泛应用于生物分析的体外核酸扩增，本文综合国内外报道，对等温核酸扩增技术的进展进行简要综述，包括依赖核酸序列型扩增（NASBA）、链置换扩增（SDA）、滚环扩增（RCA）、环介导等温扩增（LAMP）、单引物等温扩增（SPIA）、交叉引物等温扩增（CPA）、新型等温多自配引发扩增（IMSA）的原理、重要特性、应用及未来的展望。 核酸基于其生物特性被用来作为生物研究和医疗诊断的重要生物标志物。聚合酶链式反应（PCR）是第一个也是最受欢迎的用于扩增及低丰度检测核酸扩增技术。尽管PCR 技术被广泛地应用到各个领域，但他需要反复的热循环及精密仪器的缺点限制了其在资源有限或实地分析中的应用。近年来出现及迅猛发展的等温核酸扩增技术有望成为未来发展的新趋势，因为其只需恒温装置（例如：水浴锅），便能进行快速且高效的扩增反应。从20 世纪90 年代始，很多等温核酸扩增技术被发展起来，多种等温扩增方法都具有高灵敏度，而且有部分技术已成功转向商业化[1]。在众多的等温扩增技术中，环介导等温扩增技术应用范围较为广泛，其他的等温扩增技术还有依赖核酸序列型等温扩增、链置换等温扩增、滚环等温扩增、单引物等温扩增、交叉引物等温扩增。本文综述了这些等温扩增技术及其在分子诊断的应用，并探讨等温扩增技术的发展及前景。 2 等温核酸扩增技术 2.1 依赖核酸序列型扩增技术 依赖核酸序列型扩增技术（nucleic acid sequence-based amplification，NASBA）[2]，是一种基于转录依赖扩增系统建立起来的等温扩增技术。NASBA 通过模拟逆转录病毒复制方式设计而成，用于扩增单链RNA 序列。NASBA 的基本原理是模板RNA 被反义引物识别，并在逆转录酶的RNA 依赖型DNA 聚合酶活性作用下形成互补DNA 链，而RNA-DNA 复合体被核糖核酸酶H（RNase H）处理，使得原来的RNA 链被降解，接着在逆转录酶的DNA 依赖型DNA 聚合酶活性作用下，含T7 启动子的特异引物（oligdNTP）识别新合成的单链DNA 链，形成含T7 启动子的双链DNA 结构，该结构可作为随后循环扩增的底物。T7RNA 聚合酶能够使带T7 启动子的DNA链作为模板合成与原来RNA 链序列相似的新的RNA 链。 通常NABSA 能在41℃条件下进行，经过1.5～2 h 的扩增可将模板RNA 放大至109 倍，灵敏度与RT-PCR 的相当。NABSA 的终产物可用凝胶电泳、实时荧光法、比色法及电化学发光法检测，FDA 已批准使用NASBA 技术在HCV 和HIV-...
