组化染色综合版2VIP免费

1 瑞氏-姬姆萨染色 Wright’s-Giemsa Stain 4.2试剂 （1）瑞氏-姬姆萨复合染色液（I液）——瑞氏染色粉 1g，姬姆萨染粉 0.3g，甲醇（A.R）500ml，中性甘油 3.3ml。将瑞氏染粉和吉姆萨染粉置洁净研钵中，加中性甘油研磨，再放入 37℃孵箱孵育 24小时后，加入少量甲醇研磨，吸出上液，如此连续几次，共用甲醇 500ml 。收集于棕色玻璃瓶中存放一周即能使用。存储时间越久染色效果越好。中性甘油可防止甲醇挥发，使细胞染色较清晰。 （2）磷酸盐缓冲液（II 液）（pH6.4～6.8）——磷酸二氢钾(K2HPO4)6.64g，磷酸氢二钠(Na2HPO4。12H2O)2.56g，用磷酸盐调整 pH，加蒸馏水至 1000ml。 6 . 操作方法 （1）染色 将玻片滴加瑞氏-姬姆萨复合染色液（I液）3～5 滴，使其迅速盖满涂片，再按 1：1或 1：2的比例滴加磷酸盐缓冲液（II 液），轻轻摇动玻片使染液充分混合。 9．正常结果范围及结果解释 1. 染色结果偏酸者，则红细胞和嗜酸性颗粒偏红，白细胞的核呈浅色或不着色。 2. 染色结果偏碱，所有红、白细胞染灰蓝色，颗粒深暗。嗜酸性颗粒可染成暗褐色甚至黑紫色或蓝色。中性颗粒也偏碱（紫黑色）。遇此种情况应更换缓冲液。 2 铁粒染色（Iron Stain） 2．实验原理 正常人骨髓中以含铁血黄素的形式储存的铁粒属细胞外铁；而幼红细胞的胞质中含有的铁颗粒属于细胞内铁，这种细胞称为“铁粒幼细胞”。骨髓中细胞外铁和幼红细胞内的铁颗粒与酸性亚铁氰化钾溶液作用，发生普鲁士蓝反应，生成蓝色亚铁氰化钾沉淀，定位于含铁的部位。 4.3试剂配制 4.3.1酸性亚铁氰化钾溶液 4.3.1.1 把 200g亚铁氰化钾溶于1000ml蒸馏水中。 4.3.1.2 取 5ml 200g/L亚铁氰化钾溶液置于试管中，缓缓加入 1ml浓盐酸。临用前新鲜配制。 4.3.2 2g/L核固红－硫酸铝溶液 取硫酸铝 10g加入 100ml DH2O再加入核固红EMER出品 0.2g，置于37℃水浴中1小时，并经常振荡，使溶解，过滤后使用。 贴上“2g/L核固红－硫酸铝溶液”的标签并注明配制日期和失效日期。室温保存。 5.2. 质控标准 正常的阳性结果为：外铁为＋～＋＋，铁粒幼红细胞＞20%。 6．操作方法 6.1选骨髓小粒丰富的骨髓涂片，用甲醇固定10分钟。（这一步骤可省略） 6.2玻片上滴加酸性亚铁氰化钾，染色 30分钟。（可置于37℃）。 6.3用 DH2O冲洗后用核固红染液复染 10～15分钟。 6.4流水冲洗，晾干，油镜检查。 6.5 先用低倍镜判断细胞外铁，再用油镜计数 100个幼...