精品文档---下载后可任意编辑3,4 苯并芘(BaP)体外诱导内皮祖细胞(EPCs)功能损伤的机制的开题报告背景与意义：3,4 苯并芘(BaP)是一种常见的多环芳香烃，广泛存在于大气、水体、土壤等环境中。在人体内，BaP 主要通过吸入和饮食的途径进入体内，进而导致多种疾病的发生。近年来，越来越多的讨论表明，BaP 对内皮细胞的损伤是导致多种疾病的主要原因之一。内皮细胞是血管内膜的主要成分，具有维持血管平滑、细胞黏附等关键功能。内皮祖细胞(EPCs)是一种种多潜能干细胞，可通过血液循环由骨髓中迁移至受损的血管内膜，并分化为内皮细胞，重建受损血管内膜组织。因此，EPCs 的功能损伤会导致血管的重建受到限制，进而导致多种心血管疾病(如心肌梗死和脑梗死)。虽然 BaP 对 EPCs 损伤存在讨论，但其损伤机制尚不清楚。因此，在本讨论中，我们旨在探讨 BaP 对 EPCs 功能损伤的机制。计划与方法：1. EPCs 培育使用酶法、贴壁法等方法从小鼠骨髓中获得 EPCs，混合细胞筛选出CD34+CD133+KDR+羊水干细胞，维持在 EPCs 培育基中，并增加VEGF 等生长因子的刺激，以维持细胞的增殖。2. BaP 暴露将 EPCs 分为两组，一组为对比组，一组为 BaP 组。将 BaP 加入到EPCs 培育基中，暴露时间为 24h。3. 紫外线诱导氧化应激实验通过紫外线诱导氧化应激实验，测定 EPCs 对氧化应激的响应，使用 DCFH-DA 荧光染色法测定 ROS 的产生和 MDA 的含量测定脂质过氧化物的生成。4. 细胞凋亡分析使用 Annexin V/PI 双染技术和荧光显微镜，测定 EPCs 的细胞凋亡率。5. 移动实验精品文档---下载后可任意编辑使用 Boyden 室进行细胞迁移实验, 分析 EPCs 的迁移能力。预期结果：我们估计通过上述实验，确定 BaP 暴露导致 EPCs 功能损伤的机制。我们希望能够证明以下假设: BaP 可以诱导 EPCs 的凋亡、增加氧化应激和抑制 EPCs 的迁移能力。这将为进一步阐明如何减少 BaP 引起心血管疾病的风险以及心血管疾病的治疗提供新的方向。
