第十六章 实验技术 实验一 糖类的颜色反应 一、实验目的 1.了解糖类某些颜色反应的原理。 2.学习应用糖的颜色反应鉴别糖类的方法。 二、实验原理 1.α-萘酚反应(Molisch 反应)原理 糖在浓无机酸(硫酸、盐酸)作用下,脱水生成糠醛及糠醛衍生物,后者能与 α-萘酚生成紫红色物质。因为糠醛及糠醛衍生物对此反应均呈阳性,故此反应不是糖类的特异反应。 2.间苯二酚反应(Seliw anoff 反应)原理 在酸作用下,酮糖脱水生成羟甲基糠醛,后者再与间苯二酚作用生成红色物质。此反应是酮糖的特异反应。醛糖在同样条件下呈色反应缓慢,只有在糖浓度较高或煮沸时间较长时,才呈微弱的阳性反应。在实验条件下蔗糖有可能水解而呈阳性反应。 三、器材 1.试管及试管架 2.滴管 3.水浴锅 四、试剂 1.莫氏(Molisch)试剂: 5% α-萘酚的酒精溶液,称取 α-萘酚 5g,溶于 95%酒精中,并用此酒精使总体积达 100mL,贮于棕色瓶内。此试剂需新鲜配制。 2.塞氏(Seliw anoff)试剂:称取间苯二酚 0.05g 溶于 30 mL 浓盐酸中,再用蒸馏水稀释至 100 mL,此试剂需新鲜配制。 3.1%葡萄糖溶液:称取葡萄糖1g,溶于 100mL 蒸馏水中。 4.1%果糖溶液:称取果糖1g,溶于 100mL 蒸馏水中。 5.1%蔗糖溶液:称取蔗糖1g,溶于 100mL 蒸馏水中。 6.1%淀粉溶液:称取可溶性淀粉 1g 与少量冷蒸馏水混合成薄浆状物,然后缓缓倾入沸蒸馏水中,边加边搅,最后以沸蒸馏水稀释至 100mL。 7.0.1%糠醛溶液:称取糠醛 0.1g,溶于 100mL 蒸馏水中。 8.浓硫酸 500mL 五、操作 1.α-萘酚反应(Molisch 反应) 取 5 支试管,分别加入 1%葡萄糖溶液、1%果糖溶液、1%蔗糖溶液、1%淀粉溶液、0.1%糠醛溶液各 1.5mL。再向 5 支试管中各加入 2 滴莫氏试剂,充分混合。斜执试管,沿管壁慢慢加入浓硫酸约1mL,慢慢立起试管,切勿摇动。浓硫酸在试液下形成两层。在二液分界处有紫红色环出现。观察、记录各管颜色。 试剂 现象 解释现象 1%葡萄糖溶液 1%果糖溶液 1%蔗糖溶液 1%淀粉溶液 0.1%糠醛溶液 2.间苯二酚反应(Seliwanoff 反应) 取 3 支试管,分别加入1%葡萄糖溶液、1%果糖溶液、1%蔗糖溶液各 5mL。再向各管分别加入塞氏试剂 2mL,混匀。将 3 支试管同时放入沸水浴中,注意观察、记录各管颜色的变化及变化时间。 六、思考题 1.可用何种颜色反应鉴别酮糖的存在? 2.α-萘酚反应的原理是什么? 实验二...