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实验四酵母菌的形态观察

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实验四 酵母菌的形态观察, 死活细胞鉴别,微生物测量技术,显微镜直接计数法 生物科学 贺冰冰 040012010025 周二 9、0 节 一 实验目的 1.观察酵母菌的形态及出芽生殖方式,学习区分酵母菌死活细胞的实验方法;掌握酵母菌的一般形态特征及其与细菌的区别。 2.了解目镜测微尺和镜台测微尺的构造及使用原理,掌握测定微生物细胞大小的方法 . 3. 了解血球计数板的构造和使用方法,学会用血球计数板对酵母细胞进行计数。 二 实验原理 美蓝是一种无毒性的染料,它的氧化型呈蓝色,还原型无色。用美蓝对酵母的活细胞进行染色时,由于细胞的新陈代谢作用,细胞内具有较强的还原能力,能使美蓝由蓝色的氧化型变为无色的还原型。因此,具有还原能力的酵母细胞是无色的,而死细胞或代谢作用微弱的衰老细胞则呈蓝色或淡蓝色。 微生物细胞的大小是微生物重要的形态特征之一,由于菌体微小,只能在显微镜下测量。用于测量微主物细胞大小的工具有目镜测微尺和镜台测微尺。 目镜测微尺是一块圆形玻片,在玻片中央把 5mm长度刻成 50等分,或把 10 mm长度刻成 100等分。测量时,将其放在接目镜中的隔板上(此处正好与物镜放大的中间物像重叠)用于测量经显微镜放大后的细胞物象。由于不同目镜、物镜组合的放大倍数不相同,目镜测微尺每格实际表示的长度也不一样,因此目镜测微尺测量微生物大小时须先用置于镜台上的镜台测 微尺校正,以求出在一定放大倍数下,目镜测微尺每小格所代表的相对长度。 镜台测微尺是中央部分刻有精确等分线的专用载玻片,一般将 lmm等分为 100格,每格长10μ m,每格长(0.01mm),是专门用来校正目镜测微尺的。校正时,将镜台测微尺放在载物台上,由于镜台测微尺与细胞标本是处于同一位置,都要经过物镜和目镜的两次放大成像进入视野,即镜台测微尺随着显微镜总放大倍数的放大而放大,因此从镜台测微尺上得到的读数就是细胞的真实大小,所以用镜台测微尺的已知长度在一定放大倍数下校正目镜测微尺,即可求出目镜测微尺每格所代表的实际长度,然后移去镜台测微尺,换上待测标本片,用校正好的目镜测微尺在同样放大倍数下测量微生物细胞大小。 利 用 血 球 计 数 板 在 显 微 镜 下 直 接 计 数 , 是 一 种 常 用 的 微 生 物 计 数 方 法 。 此 法 的 优 点 是 直 观 、快 速 。 将 经 过 适 当 稀 释 的 菌 悬 液 ( 或 孢 子 悬 液 ) 放 在 ...

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