【一、提RNA】 一、实验准备： 1、试剂：75%乙醇、Trizol、1
5mL 进口EP 管、氯仿、异丙醇、进口枪头(RNA 专用)、 2、配75%乙醇(DEPC 水+无水乙醇)，放-20℃冰箱预冷； 3、预冷离心机(1
5mL EP 管用的)； 4、清洁桌面，酒精喷过之后擦干，新手套、两层口罩； 二、操作步骤： 01、弃上清（不回收，直接倒去）； 02、1mL/孔 PBS 洗两遍（不回收，直接倒去，随后用200μL 枪吸尽 PBS）； 03、每孔加 500μL Trizol，轻晃，随后室温放置 2min 左右； 04、枪头吹打，吸出放入 1
5mL 进口EP 管； 05、加入 100μL 氯仿(即 1/5 体积的trizol)； 06、4℃离心机，12000g，15min； 07、吸 200μL(可减少)上清放入新的1
5mL 进口EP 管中（注意：只能吸到上清）； 08、加入等体积异丙醇，充分混匀，常温放置 10-30min(15min)； 09、4℃离心机，12000g，10min； 10、倒掉液体，加入 1mL 预冷的75%乙醇剧烈混匀； 11、4℃离心机，7500g，5min； 12、倒掉上清，加入 1mL 预冷的75%乙醇，混匀； 13、4℃离心机，7500g，5min； 14、倒掉上清，倒扣在餐巾纸上，5-10min，用针头或者 200 微升枪头去掉管壁上的水珠； 15、每管中加入 40μL(40μ-60μL)的DEPC 水，吹打溶解； 16、测浓度（先知楼21 楼测RNA 浓度，带DEPC 水、灭菌的dd 水、10 微升枪和枪头）； 三、注意事项 01、如果当时不测RNA 浓度，可暂时把RNA 放在-20℃冰箱
但长时间(>24h)保存，需要放在-80℃冰箱； 02、异丙醇作用是沉淀RNA，作用比 乙醇好 ； 03、 04、 05、 06、 07、 08、
