康腹止泻片养基稀释法VIP专享

康腹止泻片养基稀释法 1 仪器与试药 菌种 金黄色葡萄球菌[CMCC26003]、大肠埃希菌[CMCC44102]、枯草芽孢杆菌[CMCC63501]、白色念珠菌[CMCC10123]，均购自中国药品生物制品检定所;黑曲霉购自广东省微生物讨论所。 培育基 营养琼脂培育基、玫瑰红钠琼脂培育基、营养肉汤培育基、改良马丁培育基、改良马丁琼脂培育基、胆盐乳糖培育基。 供试品 康腹止泻片，大幸药品株式会社。 2 方法与结果 菌液的制备[4] 大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌 取新奇培育物接种至营养肉汤培育基中，培育 18～24h;培育物用%无菌氯化钠溶液制成每 1mL 含菌数为 50～100cfu 的菌悬液。用于控制菌验证时制成每 1mL 含菌数为<100cfu 的菌悬液。 白色念珠菌取新奇培育物接种至改良马丁培育基中，培育 24～48h;培育物用%无菌氯化钠溶液制成每 1mL 含菌数为 50～l00cfu 的菌悬液。 黑曲霉取新奇培育物接种至改良马丁琼脂斜面培育基中，培育 5～7d，加入%无菌氯化钠溶液 3～5mL，将孢子洗脱。然后，用适宜的方法吸出胞子悬液至无菌试管内，用%聚山梨醇的%无菌氯化钠溶液制成每 lmL含孢子数 50～100cfu 的孢子悬液。 供试液的制备 取样品 10g，加入氯化钠?驳鞍纂嘶撼逡褐?100mL，用匀浆仪打碎，摇匀，制成1∶10 的供试液。 验证试验 验证实验所用培育基均按《中国药典》2025 年版附录“微生物限度检查法”要求，进行培育基适用性检查，且均符合规定。 细菌、真菌及酵母菌计数在确定适合的检查方法后，验证试验至少应进行 3 次独立的平行试验，并分别计算各试验菌每次试验的回收率。 试验组:各取 1∶10 供试液 1、、和试验菌液 1mL，分别注入平皿中，立即倾注相应琼脂培育基，每株试验菌平行制备 2 个平皿，按平皿法测定其菌数。 菌液组:取试验菌液 1mL 注入平皿中，立即倾注相应琼脂培育基，每株试验菌平行制备 2 个平皿，测定所加的试验菌数。 供试品对比组:各取 1∶10 供试液1、、，按试验组操作，不加菌液，测定样品本底菌。 计算各试验菌株的回收率，结果见表1。表 1 计数验证菌各菌株回收率结果 由表 1 可见:黑曲霉的回收试验，当供试液为 1mL?皿-1 时，3 次试验的回收率均即可达到 70%以上;白色念珠菌当稀释至?皿-1 时，3 次试验的回收率达到 70%以上;而大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌 3 个菌株的回收率试验，要稀释至?皿-1，3 次验证的回收率才能均达到 70%以上。因此本品...