蛋白质印迹缓冲液和母液

蛋白质印迹缓冲液与母液RIPA 缓冲液RIPA 缓冲液含有离子去垢剂脱氧胆酸钠作为活性成分，特别适用于破坏核膜提取细胞核内物质。RIPA 缓冲液产生得背景低，但可使激酶变性。它还能破坏蛋白质与蛋白质得相互作用，因此可能会给免疫沉淀分析与 pull-down 实验带来一些问题。50 mM Tris HCl，pH 8、0150 mM NaCl1% NP-400、5% 脱氧胆酸钠0、1% SDS10% 脱氧胆酸钠母液（5 g 脱氧胆酸钠溶于 50 mL 溶液中）避光保存。NP-40 缓冲液20 mM Tris HCl，pH 8、0137 mM NaCl10% 甘油1% NP-402 mM EDTA细胞骨架结合蛋白提取缓冲液10 mM Tris，pH 7、4100 mM NaCl1 mM EDTA1 mM EGTA1 mM NaF20 mM Na4P2O72 mM Na3VO41% Triton X-10010% 甘油0、1% SDS0、5% 脱氧胆酸盐可溶蛋白缓冲液20 mM Tris-HCl，pH 7、51 mM EGTA（Ca2+ 螯合剂）制备原钒酸钠所有流程必须在通风橱中进行。1、 用双蒸水制备 100 mM 原钒酸钠溶液2、 用 HCl 将 pH 调节至 9、03、 煮沸至无色4、 冷却至室温5、 再次将 pH 调节至 9、06、 再次煮沸至无色7、 重复以上循环，直到煮沸并冷却溶液之后得 pH 保持 9、08、 用水补至初始体积9、 分装之后保存于 -20 ℃10、 假如样品变黄，丢弃样品避开煮沸期间体积变化过大，可用盖子略微盖住容器上方，减少蒸发。TBS 10×（浓缩 Tris 缓冲盐溶液）1 L 溶液：24 g Tris 碱（式量：121、1 g）88 g NaCl（式量：58、4 g）溶于 900 mL 蒸馏水中用 12 N HCl 将 pH 调节至 7、6加入蒸馏水至终体积为 1 L要制备 1× 溶液，将 1 份 10× 溶液与 9 份蒸馏水混合，并再次将 pH 调节至 7、6。1× 溶液得最终摩尔浓度为 20 mM Tris 与 150 mM NaCl。Tris 缓冲液得替代配方同时含有 Tris 碱与 Tris-HCl。这可避开大量使用具有潜在危险性得盐酸来中与单独得 Tris 碱。TBS 10× 替代配方（浓缩 Tris 缓冲盐溶液）1 L 溶液：24 g Tris-HCl（式量：157、6 g）5、6 g Tris 碱（式量：121、1 g）88 g NaCl（式量：58、4 g）溶于 900 mL 蒸馏水中1、 在室温下将溶液 pH 调节至约 7、6。假如溶液过碱，用浓 HCl 将 pH 调节至 7、6；假如溶液过酸，用浓 NaOH 将 pH 调节至 7、6。2、 加入蒸馏水至终体积为 1 L。3、 要制备 1× 溶液，将 1 份 10× 溶液与 9 份蒸馏水混合，并再次将 pH...