不同品种葛根中葛根素及总黄酮的含量测定【摘要】 目的建立不同品种葛根中葛根素及总黄酮的含量测定方法
方法采纳 RP-HPLC 法,以甲醇-水为流动相,检测波长为 250 nm 测葛根素含量;紫外分光光度法测柴葛、粉葛中总黄酮含量
结果葛根素峰分离度提高,峰形改善;葛根素~ μg 范围内与峰面积线性关系良好,回收率为%(n=5),精密度 RSD=%
总黄酮浓度在~ μg/ml 范围内与吸收度线性关系良好;流速 1 ml/min;检测波长 250 nm;柱温 22℃;进样体积 10μl
理论板数按葛根素峰计算不低于 5000
在该色谱条件下,样品中的葛根素与其它峰均能达到基线分离,保留时间在 min 左右,对比品与样品的色谱图见图 1
图 1 对比品Ⅰ、柴葛索氏提取Ⅱ、粉葛索氏提取Ⅲ的 HPLC 色谱图 对比品溶液的制备精密称取葛根素对比品,甲醇定容于 25 ml 量瓶
分别移取,,, ml 于 5 ml 量瓶,水定容,与原液共同作为 HPLC 用对比品溶液
供试品溶液的制备 热回流提取法:精密称取柴葛、粉葛粉末各 g,置具塞锥形瓶中,精密加入 30%乙醇 50 ml,称重
回流提取 30 min,放冷,称重并以 30%乙醇补足减失重量,摇匀过滤,取续滤液为供试品,待测
索氏提取法:称取柴葛、粉葛粉末各 g, 精密称定,以甲醇为提取剂提取 4h,过滤,浓缩提取液并用甲醇定容于 10 ml 量瓶
超声处理 30min,取上清液以水定容于10 ml 量瓶,待测
线性关系考察取对比品溶液,根据“”色谱条件进样 10 μl,葛根素进样量X(μg)为横坐标,以峰面积 Y 为纵坐标绘制标准曲线,其回归方程为:Y= 6×106X + 5×104,r = 9
结果表明,葛根素进样量在~μg 范围内与峰面积线性关系良好,可用外标两点法计算含量
精密度考察在“”项色谱条件下,吸取同一对比