不同品种葛根中葛根素及总黄酮的含量测定【摘要】 目的建立不同品种葛根中葛根素及总黄酮的含量测定方法。方法采纳 RP-HPLC 法，以甲醇-水为流动相，检测波长为 250 nm 测葛根素含量；紫外分光光度法测柴葛、粉葛中总黄酮含量。结果葛根素峰分离度提高，峰形改善；葛根素～ μg 范围内与峰面积线性关系良好，回收率为%(n=5)，精密度 RSD=%。总黄酮浓度在～ μg/ml 范围内与吸收度线性关系良好；流速 1 ml/min；检测波长 250 nm；柱温 22℃；进样体积 10μl。理论板数按葛根素峰计算不低于 5000。在该色谱条件下，样品中的葛根素与其它峰均能达到基线分离，保留时间在 min 左右，对比品与样品的色谱图见图 1。 图 1 对比品Ⅰ、柴葛索氏提取Ⅱ、粉葛索氏提取Ⅲ的 HPLC 色谱图 对比品溶液的制备精密称取葛根素对比品，甲醇定容于 25 ml 量瓶。分别移取，，， ml 于 5 ml 量瓶，水定容，与原液共同作为 HPLC 用对比品溶液。 供试品溶液的制备 热回流提取法：精密称取柴葛、粉葛粉末各 g，置具塞锥形瓶中，精密加入 30%乙醇 50 ml，称重。回流提取 30 min，放冷，称重并以 30%乙醇补足减失重量，摇匀过滤，取续滤液为供试品，待测。 索氏提取法：称取柴葛、粉葛粉末各 g, 精密称定，以甲醇为提取剂提取 4h，过滤，浓缩提取液并用甲醇定容于 10 ml 量瓶。超声处理 30min，取上清液以水定容于10 ml 量瓶，待测。 线性关系考察取对比品溶液，根据“”色谱条件进样 10 μl，葛根素进样量X(μg)为横坐标，以峰面积 Y 为纵坐标绘制标准曲线，其回归方程为：Y= 6×106X + 5×104，r = 9。结果表明，葛根素进样量在～μg 范围内与峰面积线性关系良好，可用外标两点法计算含量。 精密度考察在“”项色谱条件下，吸取同一对比品溶液 10 μl，连续进样 5 次，测得峰面积，RSD=%，表明进样与峰面积积分的精密度良好。 重复性考察取同一批柴葛、粉葛样品 5份，按“”项下的方法制样后，以“”项色谱条件进样 10 μl，测定葛根素的峰面积，按外标法计算含量，RSD=%，表明分析方法重复性良好。 稳定性考察精密吸取对比品溶液 10 μl，分别在 0，1，2，4，8，12，24，48 h 时进样，在 “”项下色谱条件下测定峰面积，其 RSD 值为%。表明葛根素在室内正常条件下 48 h 内稳定，因此整个实验过程可以在常温不避光的条件下操作。 回收率考察精密称取已知葛根素含量的同一样品药材...
