本科学生综合性实验报告光合色素的提取、理化性质 分离、吸收光谱及含量的测定学号： 1 姓名： 王晓莲 学院： 生命科学学院 专业、班级 13 生物科学 C 班 实验课程名称： 植物生理学 实验 老师及职称： 李忠光 开课学期： 2025 至 2025 学年 下 学期 填报时间： 2025 年 4 月 2 日云南师范大学教务处编印实验序号 实验二实验名称光合色素的提取、理化性质分离、吸收光谱及含量的测定实验时间实验室睿智三 4281．实验目的（1）掌握光合色素的提取方法以及了解有关的理化性质。（2）掌握光合色素的分离方法以及了解有关的吸收光谱。（3）掌握用分光光度计测定叶绿素含量的方法2． 实验原理Ⅰ 光合色素的提取与理化性质 光合色素能溶于具有一定极性的有机溶剂，如丙酮、乙醇等。提取液中无任何电子受体，因此可以观察荧光现象。离体叶绿素在有氧气和光照条件下，发生光氧化作用，结构遭到破坏，形成加氧叶绿素等产物。叶绿素是一种双羧酸酯，可以发生皂化反应。叶绿素分子中 Mg2+与仆啉环结合不稳定，可以被 H+、Cu2+、Zn2+等离子所取代。Ⅱ 光合色素的分离与吸收光谱 光合色素能溶于具有一定极性的有机溶剂，如丙酮、乙醇等。不同光合色素的分子量、分子结构、极性、溶解度、支持物对它们的吸附力等不同，因而分配系数不同，故彼此可以分开。叶绿素的卟啉环结构对光有很强的吸收，主要是红光和蓝紫光。Ⅲ 光合色素含量的测定混合液中的两个或多各组分，只要它们的光谱吸收峰不互相重叠，仍然可以根据 Lambert-Beer 定律（A = k L C）求出各组分含量。Lambert定律：A = k L；Beer 定律 A = k C。叶绿素 a、b 在 80%丙酮溶液中的Amax 分别为 663nm、645nm，由此得出：见推导过程Ca = A663 – A645；Cb = A645 – A663Ca+b = A663 + A645A663 = + A645 = + 由于 K 是一个常数，而 A 可以通过分光光度计测出，故求二元一次方程组可得到此公式。k——比吸收系数。即溶剂和波长不变的情况下，当物质的浓度(C)为1g/L%)，比色皿的直径(光径，L)为 1cm 时所测出的吸光度即为比吸收系数。故其单位为：ε——摩尔吸收系数。即溶剂和波长不变的情况下，当物质的浓度(C)为 1mol/L，比色皿的直径(光径，L)为 1cm 时所测出的吸光度即为摩尔吸收系数。故其单位为： 3． 实验设备及材料（1）材料 新奇植物叶片、丙酮、碳酸钙、石英砂、20%KOH 甲醇溶液、苯、 自来水、50%...
