1、7、1 修整组织将手术切取得乳腺肿瘤切成一个平整面,各组织块不宜太大,以便固定剂穿透与组织脱水等操作,通常以 10 mm×10 mm×3mm 或 5mm×5mm×3mm 为宜
找到不同得部位切取 2 块,以备后用
1、7、2 组织洗涤 组织经修整后,组织中得福尔马林等必须冲洗洁净,尤其就是含有重金属得物质存在
因为残留在组织中得福尔马林,有得不利于染色,有得产生沉淀或结晶影响观察,所以组织修整后应冲洗 12h 左右
1、7、3 组织脱水组织经洗涤后,组织中含有大量水分,由于水与石蜡不能互溶,所以必须将组织中得水分除去
80%乙醇溶液:2h95%乙醇溶液:1h95%乙醇溶液:1h100%乙醇溶液:30min100%乙醇溶液:30min1、7、4 组织透明由于乙醇与石蜡不相溶,而二甲苯既能溶于乙醇又能溶于石蜡,所以脱水后还要经过二甲苯以过渡
当组织中全部被二甲苯占有时,光线可以透过,组织呈现出不同程度得透明状态
二甲苯Ⅰ:30min二甲苯Ⅱ:10min1、7、5 组织浸蜡浸蜡得目得就是除去组织中得透明剂(如二甲苯等),使石蜡渗透到组织内部达到饱与程度以便组织包埋
浸蜡时间根据组织得透蜡时间较长,需 3h 左右
浸蜡应在恒温箱内进行,并保持箱内温度在 55℃左右,注意温度不要过高,以免组织发脆
石蜡Ⅰ:1h石蜡Ⅱ:1h
石蜡Ⅲ:1h1、7、6 组织包埋将经过透蜡得组织连同熔化得石蜡,一起倒入容器内,然后立即投入冷水中,使其立即凝固成蜡块得过程
包埋时,将纸盒放在温箱旁边,用镊子夹取组织平放于纸盒底部,,再用温镊子轻轻拨动组织,从温箱中取出盛放纯石蜡得蜡杯,沿壁倒入包埋用得纸盒中,速度要慢
待石蜡凝固(约 30min)后放入冰箱保鲜层内以备后用
包埋时应根据组织材料、切片厚度、气候条件等因素,选择不同熔点得石蜡,新得石蜡一般要熬顿几次,以免石蜡固定后有气泡,影响切片