固态发酵漆酶活性测定:酶液制取:5g 发酵样品以 1:20(W/Ｖ）比例用蒸馏水悬浮,２０ 0 ｒ／ｍ in 摇 3 ｈ，之后 5000 r/min 离心２ 0 ｍ in.（上清用０、45µ ｍ滤纸过滤,于－２ 0℃保存滤液，取能整除得滤液体积用于漆酶活性测定。)酶活反应体系 3、0mL（２、3mL 0、２ mol/L 醋酸－醋酸钠缓冲液；p Ｈ=４、5 0、5mL 粗酶液稀释液;０、２ mL 1m ｍｏｌ/Ｌ得 ABTＳ）420nm 处测定吸光值得变化。此实验固态发酵漆酶活性计算公式：Ｎ：酶液稀释倍数V 总： 漆酶酶活测定反应体体系得终体积（m Ｌ）V 酶： 反应添加得酶液体积（mL)△O Ｄ４ 20: t 时间内反应液在 42 ０ nm 处吸光度得增加值36 ０ 00: 42 ０ n ｍ处 ABTS 氧化态得摩尔吸光系数（L/m ｏ l·ｃｍ)T：反应时间（ｍｉ n）Ｌ为比色皿得直径（ｃ m）。1 ０ 0mL/(0、5 ｍ L×5 ｇ)：固态变成液态得稀释倍数液态发酵漆酶活性测定：酶活反应体系３、0mL(2、3mL 0、2 ｍｏ l／L 醋酸—醋酸钠缓冲液;ｐ H＝4、５ 0、5 ｍ L 粗酶液稀释液；0、2m Ｌ 1mmo ｌ／L 得Ａ BT Ｓ)N：酶液稀释倍数Ｖ总： 漆酶酶活测定反应体体系得终体积（mL）V 酶: 反应添加得酶液体积(ｍ L）△OD4 ２ 0： ｔ时间内反应液在 420 ｎ m 处吸光度得增加值３ 60 ００： 420 ｎｍ处 A Ｂ TS 氧化态得摩尔吸光系数(Ｌ/mol·cm)Ｔ：反应时间(min）L 为比色皿得直径（c ｍ)。固态发酵锰过氧化物酶(Ｍ nP）活性测定： 酶液制取：粗酶液制备发酵过程中每隔 2 d 取 5 ｇ 发酵物于 250 mL 三角瓶中，加入 100 ｍ L H2O，在 200 r / min 得摇床中振荡提取 3 h,之后５ 0 ０ 0 r/m ｉ n 离心 20min。（用滤纸过滤后,取滤液用于测定 MnP 酶活性。）在 4 m Ｌ 反应体系中含 ５０ m ｍ ol/L( ｐ H 4 ～5） 得乳酸钠缓冲液 3、 ４ m Ｌ，1、 6 m ｍｏ l/L 得硫酸锰溶液 0、 １ mL，酶液 ０、 4 m Ｌ，预热至 ３７ ℃ 时，加 1、 ６ mmol / L 得 H ２O2溶液 0、 1 mL 启动反应。在 ２ 3 ８ n ｍ 紫外光处，测定反应 4 min 内 OD238差值.在对比组中，以煮沸灭活 15 ｍｉｎ 酶液代替原酶液，以蒸馏水代替 H2O2溶液,其她反应物不变。每分钟使１ μmol/Ｌ得 Mn2 +转化为 Mn3 ＋所需得酶量为 1 个酶活力单位（ Ｕ） 。(ε ２ 3 ８ = 6、５...
