基因工程复习提纲1.什么是基因?基因:是 DNA 分子中含有特定遗传信息的一段核苷酸序列,是遗传物质的最小功能单位。种类:编码蛋白的基因、只转录而无翻译功能的基因(tRNA,rRNA)、不转录的基因。2.基因工程的诞生基因工程诞生于 1973 年。 1973-1974 年,美国科学家科恩等以大肠杆菌为材料,成功地进行了三次基因工程试验。试验结果证明,用基因工程可以打破不同物种间在亿万年中形成的天然屏障,任何不同种类生物的基因都有可能通过基因工程技术而组合到一起。人类进入了激动人心的基因工程时代。第一个实现 DNA 重组的人-Berg1972 年,Berg 用 E.coRⅠ 切割 SV40DNA 和 λphage DNA,经过连接组成重组的 DNA 分子。Berg 是第一个实现 DNA 重组的人。第一个取得基因工程成功的人-Cohen1973 年,Cohen Group 将 E.coli 的 tetr 质粒 psclol 和 nersrR6-3 质粒进行体外限制酶切割,并连接成一个新的质粒,转化 E.coli,在含四环素和新霉素的平板上筛选出了 tetrNer 的转化子,实现了细菌遗传性状的转移。这是基因工程史上的第一个克隆并取得成功的例子,这一年被定为基因工程诞生的元年。Gohen Group 第一次实现了细菌遗传性状转移示意图1、理论上的三大发现(1)40 年代发现了生物的遗传物质是 DNA。 (2)50 年代搞清楚了 DNA 的双螺旋结构和半保留复制机理。 (3)60 年代确定了遗传信息的传递方式。2、技术上的三大发明(1)限制性核酸内切酶(restriction enzymes)的发现20 世纪 40-60 年代,科学家们就为基因工程设计了美好的蓝图,但是面对庞大的dsDNA 束手无策,无从下手把它切成单个基因片断。当时的酶学知识已有相当的进展,但是没有一个已发现的酶能完成这样的使命。1970 年,Smith 和 Wilcox 在流感嗜血杆菌(Haemophilus inffuenzae)分离纯化了 HindⅡ,取得了突破,打破了基因工程的禁锢,迎来了改造生物的春天,为基因工程奠定了最为重要的技术基础。(2)DNA 连接酶(ligase)的发现(3)基因工程载体(vector)的发现有了切割与缝合(ligase)基因 DNA 的工具,还得有一个“车子”将重组 DNA 送到宿主细胞中去。1946 年起,Lederberg 开展了细菌性因子(F 因子)的讨论。50-60 年代相继发现了 R 因子(抗药因子),CoE(大肠杆菌因子)等质粒。直到 1973 年,Cohen 开始将质粒作为基因工程载体使用(至今一直是基因工程最重要最广...