实验八 酵母菌得形态观察及死活细胞鉴别一、实验目得1、观察酵母菌得形态及出芽生殖方式;2、 学习区分酵母菌死活细胞得实验方法;3、掌握酵母子囊孢子得观察方法
二、实验原理1、 酵母菌酵母菌就是不运动得单细胞真核微生物,其大小通常比常见细菌大几倍甚至十几倍,不必染色即可用显微镜观察其形态
但由于细胞个体大,采纳涂片得方法制片有可能损伤细胞,一般通过美蓝染液水浸片法或水-碘液浸片法来观察酵母细胞
大多数酵母以出芽方式进行无性繁殖,也可以通过接合产生子囊孢子进行有性繁殖
本实验通过美蓝染液水浸片法来观察酵母得形态与出芽生殖方式,并对酵母细胞进行死活染色鉴别
2、 美蓝染液美蓝就是一种无毒性得染料,它得氧化型呈蓝色,还原型无色
用美蓝溶液对酵母活细胞染色时,由于细胞得新陈代谢作用,细胞内具有较强得还原能力,能使美蓝由蓝色得氧化型变为无色得还原型,而对代谢作用微弱或死细胞,无此还原能力或还原能力极弱,而被美蓝染成蓝色或淡蓝色
因此,不仅用此法可观察酵母细胞形态,也可用来鉴别酵母菌得死细胞与活细胞
三、实验材料1、 菌种酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)培育 1 天得麦芽汁(或豆芽汁)液体培育物
2、 溶液或试剂0、1%吕氏碱性美蓝溶液、5%孔雀绿水溶液、0、5%番红水溶液、95%乙醇,等
器材显微镜,擦镜纸,吸水纸,载玻片、盖玻片、酒精灯、接种环、镊子等等
四、实验步骤1、酵母菌出出芽方式得观察及死活鉴定(1)在载玻片中央加一滴 0、1%吕氏碱性美蓝染色液,然后按无菌操作接种蘸取取少量液体酵母放在染液中,混合均匀,染液不宜过多
注:染液不宜过多或过少,否则,在盖上盖玻片时,菌液会溢出或出现大量气泡
用接种环将菌体与染液混合时,不要剧烈涂抹,以免破坏细胞
(2)用镊子取一块盖玻片,先将一边与菌液接触,然后慢慢将盖玻片放下使其盖在菌液上
注:盖玻片不宜平
