侯伟（汉水丑生）第2节基因工程的基本操作程序汉水丑生微信公众号专注于生物教学和高考一、获取目的基因目的基因：主要是指______________的基因。例如，与生物抗逆性相关的基因、与优良品质相关的基因、与生物药物和保健品相关的基因、与毒物降解相关的基因等。在基因工程中，获取目的基因主要有两大途径，即____________和从___________中分离。编码蛋白质人工合成生物材料生物材料人工合成获取目的基因DNAcDNA一定大小范围的DNAPCRmRNA基因组文库cDNA文库基因文库包括限制酶酶切逆转录导入受体菌中保存汉水丑生微信公众号专注于生物教学和高考思考2：两种基因文库的主要区别是什么？基因的结构，包括编码区和非编码区。编码区能够转录为相应的mRNA，进而指导蛋白质的合成，也就是说能够编码蛋白质。非编码区不能转录为mRNA，不能编码蛋白质，但是对于遗传信息的表达是不可缺少的。这是因为在非编码区上，有调控遗传信息表达的核苷酸序列，例如启动子和终止子。启动子是一段有特殊碱基序列的DNA片段，位于基因的首端，它是_____________________的部位，有了它才能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需要的蛋白质。终止子位于基因的尾端，相当于一盏红色信号灯，使______在所需要的地方停止下来。RNA聚合酶识别和结合转录原核基因的编码区是连续的。真核基因的编码区是间隔的，不连续的。能够编码蛋白质的_________被不能编码蛋白质的________分割开，成为一种断裂的形式。转录的时候，外显子和内含子都转录，但是________转录的部分会被剪切掉。外显子内含子内含子基因组文库从细胞中提取DNA细胞基因组DNA质粒质粒酶切DNA连接酶连接限制酶酶切导入细菌中基因组文库克隆提取酶切的DNA片段cDNA文库逆转录逆转录酶酶切的cDNA片段限制酶酶切质粒质粒酶切连接导入细菌中cDNA文库克隆提取汉水丑生微信公众号专注于生物教学和高考文库类型cDNA文库基因组文库文库大小基因中启动子基因中内含子基因多少物种间基因交流小大无有无有某种生物的部分基因某种生物的全部基因可以部分基因可以思考1：cDNA文库为什么也叫部分基因文库？分析：在生物的某个特定发育时期，基因组中只有______基因选择性表达，从这一时期的该生物细胞中提取的mRNA逆转录得到的cDNA只含有该物种的部分基因，而不是全部基因。思考3、为什么基因组文库中只有部分基因可以在物种间进行基因交流？分析：基因组文库中的真核基因含有内含子，而原核细胞没有内含子剪切系统，所以基因组文库中的真核基因不易在原核细胞中正常表达。动植物细胞的内含子剪切系统也有差异，所以动物基因组文库中的基因不易在植物细胞中正常表达，反之亦然。部分文库类型cDNA文库基因组文库文库大小基因中启动子基因中内含子基因多少物种间基因交流小大无有无有某种生物的部分基因某种生物的全部基因可以部分基因可以1、从生物材料中获取目的基因：包括从_______________和____________中筛选目的基因以及用______技术扩增目的基因。①某种生物的基因组文库：将某种生物体内的DNA全部提取出来，选用适当的_________，将DNA切成一定范围大小的DNA片段，然后，将这些DNA片段分别与______连接起来，导入受体菌的群体中储存，每个受体菌都含有了一段不同的DNA片段。这个菌群就叫做这种生物的基因组文库。②某种生物的cDNA文库：用某种生物发育的某个时期的______反转录产生的多种互补DNA(也叫______)片段，与载体连接后储存在一个____________中，就叫做这种生物的cDNA文库。基因组文库cDNA文库PCR限制酶载体mRNAcDNA受体菌群思考：如何从基因文库中找到我们需要的基因？根据目的基因的有关信息，例如，根据基因的核苷酸序列、基因的功能、基因在染色体上的位置、基因的转录产物mRNA，以及基因的表达产物蛋白质等特性来获取目的基因。汉水丑生微信公众号专注于生物教学和高考生物材料人工合成获取目的基因DNAcDNA一定大小范围的DNAPCRmRNA基因组文库cDNA文库基因文库包括限制酶酶切逆转录导入受体菌中保存③PCR技术扩增目的基因PCR的全称是_________________，是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术。细胞内DNA复制的时候，解旋是靠__________...
