临床标本细菌培养相关问题讨论-周庭银 [兼容模式]VIP免费

周庭银周庭银第二军医大学长征医院实验诊断科主任技师；主办国家继续教育“疑难菌株分离与鉴定”学习班15期；研制多功能体液显色培养瓶等培养基；获国家实用性专利4项发明专利1项获国家实用性专利4项、发明专利1项；主编专著7部，参编著作5部,其中《临床微生物学诊断与图解》获华东地区优秀科技图书一等奖；获华东地区优秀科技图书等奖；第一作者发表论文40余篇；临床标本细菌培养临床标本细菌培养临床标本细菌培养相关问题讨论临床标本细菌培养相关问题讨论上海长征医院周庭银主要内容主要内容�痰标本�血培养�血培养�无菌体液菌一、痰标本、痰标本痰标本存在的问题标本不符检验要求标本不符检验要求：痰标本中有食物残渣、菜叶唾液唾液标本量少标本干枯标本干枯非无菌容器留取标本标本留置时间长（苛氧菌）标本留置时间长（苛氧菌）痰涂片�是用来评价标本质量�是用来评价标本质量�细菌类别、真菌寄生虫�寄生虫�？？？前处理消化液前处理�洗痰：灭菌生理盐水冰冻冰冻过滤�液化：痰标本液化液化痰标本液化（胰酶、二硫苏糖醇）生理盐水清洗痰液�直接涂片、直接接种专利号：201320554637.6镜检：是用来评价痰标本质量？�用三分类标准（观察白细胞和上皮细胞数量1975）�用三分类标准（观察白细胞和上皮细胞数量1975）。A低倍镜下白细胞＞25，上皮细胞＜10B低倍镜下白细胞＞25，上皮细胞＜25B低倍镜下白细胞＞25，上皮细胞＜25C低倍镜下白细胞＜10，上皮细胞＞25A类标本，箭头所指的都是白细胞，可见白细胞大约在400上皮细胞3约在40～50，上皮细胞1～3。B类标本，左箭头所指的是白细胞，右箭头所指是上皮细胞白细胞大约在4050上皮细胞2630皮细胞，白细胞大约在40～50，上皮细胞26～30。C类标本箭头所指的是上皮细胞可见上皮细胞C类标本，箭头所指的是上皮细胞，可见上皮细胞30～35，白细胞3～5。痰标本痰标本革兰染色：观察细菌的形态大小和排列方式，染色属性、初步判断细菌种类、真菌。革兰阳性球菌，单个、成双短链排列，疑似为链球菌，终鉴定为腔链球菌箭头指的就链状排列最终鉴定为口腔链球菌。箭头所指的就是呈链状排列的球菌革兰阴性杆菌，长、短两种散在排列，疑似为两种细菌最终鉴定为产气肠杆菌和铜绿假单胞菌的复细菌，最终鉴定为产气肠杆菌和铜绿假单胞菌的复合菌感染。菌丝和孢子，革兰阳性，菌体呈卵圆形，疑似为真菌感染最终鉴定为热带念珠菌和光滑念珠菌的复菌感染，最终鉴定为热带念珠菌和光滑念珠菌的复数菌感染。（A）吉姆萨染色（×400）（B）革兰染色（×100）A与B？A与B？接种方式：�接种环�接种环�棉签（消化液或者生理盐水）棉签（消化液或者生理盐水）�痰涂片与培养结果间的关系三分类涂片与培养结果间的关系三分类涂片与培养结果间的关系表：492例痰标本涂片与培养结果的比较ABC总数例数百分比%例数百分比%例数百分比%例数百分比%例数百分比%例数百分比%涂片+培养+13270.598949.171411.29235涂片‐培养‐1910.162212.154032.2681涂片+培养‐211123482653372983106涂片+培养‐2111.234826.533729.83106涂片‐培养+158.022212.153326.6270合计187181124492痰涂片与培养关系痰涂片与培养关系表：368例合格痰标本涂片和培养结果对照标本数涂片(细菌)培养百分率（%）221++60.0541‐‐11.1469+‐18.7537‐+10.05注：368（A:187;B:181）涂片阳性培养阴性涂片阳性培养阴性�可能是痰标本中苛养菌不能在普通培养基上生长或者是其他生长缓慢的细菌者是其他生长缓慢的细菌�痰标本不及时送检造成留置时间过长可以导致细菌死亡�厌氧菌感染，在普通条件下不能生长�结核杆菌、嗜肺军团菌等，涂片阴性培养阳性涂片阴性培养阳性�有可能是涂片太薄，没有挑取脓性或粘性标本�不动杆菌属，其镜下形态呈革兰阴性球杆菌，与正常菌群奈瑟菌相似，易混淆观察平板的生长状况（第二天）观察平板的生长状况（第二天）�血平板：�血平板：仔细观察血平板上菌落情况，辨别1.正常菌群（草绿色链球菌、奈瑟菌等）;2.致病菌（流感嗜血杆菌、肺炎链球菌、卡他莫拉菌、溶血性链球菌）;3.条件致病菌（大肠、肺克、金葡等），排除正常菌3.条件致病菌（大肠、肺克、金葡等...