血球计数板的使用血球计数板是由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的
玻片中有四条下凹的槽,构成三个平台
中间的平台较宽,其中间又被一短横槽隔为两半,每半边上面刻有一个方格网
方格网上刻有9个大方格,其中只有中间的一个大方格为计数室,供微生物计数用
这一大方格的长和宽各为1mm,深度为0
1mm,其体积为0
计数室通常有两种规格
一种是大方格内分为16中格,每一中格又分为25小格;另一种是大方格内分为25中格,每一中格又分为16小格
但是不管计数室是哪一种构造,它们都有一个共同的特点,即每一大方格都是由16×25=25×16=400个小方格组成
血球计数板的使用方法(以计数酵母菌为例):1样品稀释的目的是便于酵母菌悬液的计数,以每小方格内含有4-5个酵母细胞为宜,一般稀释10倍即可
2将血球计数板用擦镜纸擦净,在中央的计数室上加盖专用的厚玻片
3将稀释后的酵母菌悬液用吸管吸取一滴置于盖玻片的边缘,使菌液缓缓渗入
多余的菌液用吸水纸吸取
稍待片刻,使酵母菌全部沉降到血球计数室内
4计数时,如果使用16格×25格规格的计数室,要按对角线位,取左上、右上、左下、右下4个中格(即100个小格)的酵母菌数;如果规格为25格×16格的计数板除了取其4个对角方位外,还需再数中央的一个中格(即80个小方格)的酵母菌数
5当遇到位于大格线上的酵母菌,一般只计数大方格的上方和右方线上的酵母细胞(或只计数下方和左方线上的酵母细胞)
6对每个样品计数三次,取其平均值,按下列公式计算每1ml菌液中所含的酵母菌个数
计算公式:(1)16格×25格的血球计数板计算公式:酵母细胞数/ml=100小格内酵母细胞个数/100×400×104×稀释倍数(2)25格x16格的血球计数板计算公式:酵母细胞数/ml=80小格内酵母细胞个数/80×400×104×稀释倍数血球计数板的清洁:血球汁数板使用后,用自来