文章编号：（）中图分类号：文献标识码：·实验研究·结核分枝杆菌快速培养＊金法祥，汤佳良，祝桂琅，孙小军，赵宝珊，钟建平（绍兴市第六人民医院，浙江绍兴）摘要：目的建立一种快速、简单、廉价、可靠的结核分枝杆菌培养方法。方法采用以新鲜椰子水、人血浆、甘油等混合组成的液体培养基（简称），对例临床标本进行培养，同时与罗氏培养基比较。结果培养阳性份，罗氏培养基阳性份（!!），阳性平均时间，罗氏培养基培养阳性，明显短于罗氏培养基。结论用于结核分枝杆菌培养，具有配制简单、快速、廉价、结果可靠等优点。关键词：结核分枝杆菌；快速培养；罗氏培养基结核分枝杆菌生长缓慢，为寻找一种快速、简便、成本低廉的培养方法，等用含椰子汁和马血清的培养基使培养时间缩短至［］。我们用新鲜人血浆代替马血清研制成新液体培养基，取得了满意的效果，结果报告如下。材料与方法标本我院住院和门诊的结核病患者标本份，其中痰液份，胸腹水份，尿液份，淋巴结穿刺液份。培养基制备按文献［］加以改良，配方为：天然椰子水（经过双层无菌纱布过滤）、人血浆、甘油充分混匀，分装于无菌试管中，每管，用橡皮塞塞紧，按巴氏消毒法置血清凝固器内，每天次，共次。灭菌后稍冷，每管加入氨苄西林钠"，置冰箱保存，效期个月，简称培养基。固体培养基为酸性罗氏培养基。接种方法选择干酪样、脓性痰液标本，加倍量处理液（粘稠标本适当增加处理液量），充分振荡，置水浴箱消化，其间振荡次；离心，弃上清液，沉淀物混匀，接种酸性罗氏培养基支，每支；加酚红指示剂，以中和，沉淀物涂片抗酸染色。培养基接种量依镜检菌量［］调整，以上接种"，接种"，以下接种"，均用微量加样器，所有吸头均经高压灭菌，每份接种支（实验观察中，发现镜检抗酸杆菌以上，如接种，则对照结果较难把握；而镜检抗酸杆菌阴性时，适当增加接种量，不影响对照管结果观察）。当日支作为对照离心，沉淀物涂片，抗酸染色镜检。另支为试验管放培养箱，静止培养，离心后弃上清液，加无菌蒸馏水，使沉淀物复溶，摇匀放冰箱，弃上清液，沉淀物涂片抗酸染色，培养物与对照物比较，以涂片中存在丛状、索状、团状菌团作为结核分枝杆菌繁殖依据。生长观察罗氏培养基每周次，记录细菌生长情况，周为止。另选择肺结核初治病人痰液份，抗酸杆菌均为，消化中和后，每份同时接种支培养基中，接种量均为"，第后开始观察，连续，记录各管实验结果。结果份临床标本结核分枝杆菌培养结果培养基阳性例（），罗氏培养阳性例（），二者无显著差异（"，!）。结核杆菌培养阳性时间培养基平均，较罗氏培养基平均（）提前。初治结核患者痰培养观察例患者痰标本接种培养基，逐日观察以索状物为培养阳性，第日阳性例；第日阳性例；第日例全部阳性。根据例实验观察，结核分枝杆菌培养报告较为合适。讨论结核分枝杆菌生长缓慢，繁殖代需，在罗氏培养基中，培养阳性平均时间，而采用天然椰子水为原料制成的液体培养基，接种后培养出现丛状、索状和团状物。虽不能通过使迟缓生长菌变为快速生长菌，但至少在罗氏培养基中尚未形成菌落时，已能在培养基中看到繁殖临床检验杂志年第卷第期，，，＊作者简介：金法祥，年生，男，主管检验师，大专，本科在读，主要从事临床微生物检验。的抗酸杆菌，这对于早期诊断有重要意义。我们认为这可能与椰子水中除碳水化合物和脂肪外，还含有较丰富的氨基酸、矿物质和维生素，有利于结核分枝杆菌充分利用，促进结核分枝杆菌快速生长，缩短培养时间。通过对照观察，尽管培养基成分不同，两种培养基涂片阳性标本培养效果无显著差异，而涂片阴性标本液体培养基培养结果则相对差一些，这与文献报告一致［］。有些病例涂片阳性培养阴性，可能是病人在抗结核治疗，由于药物化疗影响，存在生长期延长的低活性菌之故［］。参考文献：［］，：［］，，（）：［］俞树荣微生物学和微生物学检验［］北京：人民卫生出版社，［］单菊生，历学军，陆凤霞，等烟碱对促进结核分枝杆菌生长的初步研究［］中国防痨杂志，，（）：（收稿日期：，修回日期：）（本文编辑：杨林）文章编号：（）中图分类号：；文献标识码：·检验与临...
