第27卷增刊12008年4月海洋环境科学MARINEENVIRONMENTALSCIENCEVo1.27,Supp.1April.2008厦门同安湾赤潮水样中细菌的分离鉴定戴红(厦门市海洋与渔业环境监测站,福建厦门361005)摘要:从2007年厦门同安湾冬季中肋骨条藻赤潮的水样中分离鉴定细菌。结果表明:通过培养、分离、纯化、革兰氏染色与镜检,确认分离出革兰氏阴性杆菌;由法国梅里埃品牌ATBExpression自动细菌鉴定仪进行细菌自动鉴定,最终鉴定出菌株2株一腔隙莫拉氏菌和大肠埃希氏菌,这2株菌株均为条件致病菌。关键词:同安湾;赤潮;细菌;分离;鉴定中图分类号:Q936文献标识码:A文章编号:1007-6336(2008)增刊1-0042-03IsolationandIdentificationofmicrobefromredtideinTong’anbay,XiamenDAIHong(XiamenMarine&FisheriesEnviornmentalMonitoringStation,Xiamen361005,China)Abstract:Basedonthemicrobedata,themicrobeswereisolatedandidentifiedfromaSkeletonemacostatumredtideinTong~nbay,Xiameninwinterin2007.TheresultsshowedthatMoraxellalacunataandEscherichiacaliweridentifiedfromsamplesbycuhiva—ting,separating,sublimating,Gramstaining,observingbyamicroscopeandidenti~ingbyATBExpressionmicrobesAutomatism.Keywords:Tong’anbay;redtide;microbe;isolation;identification近年,随着赤潮的深入研究,细菌正引起人们的重视,国内外不断有关于菌藻关系的研究报道“J。细菌在自然生态系统中作为分解者具有不可忽视的作用,细菌在海洋有机质(特别是难分解的复杂有机物)的分解和无机营养再生的过程中起着很重要的作用,为赤潮藻类的生长提供营养盐和必要的生长因子。细菌也可以通过直接或间接的作用抑制藻类的生长,甚至裂解藻细胞,从而表现为杀藻效应J。因此,在赤潮水样中分离鉴定出细菌菌株,一方面可抑制对赤潮生物有促成作用的细菌进而治理赤潮,另一方面可利用抑制藻类生长的细菌治理赤潮。厦门作为一个旅游观光业发达的海湾城市,人们与海水有较多的接触,对海水中特别是在赤潮中的有害菌需有特别关注。因此对赤潮水样中细菌的分离与鉴定有其重要的意义。有关厦门海域赤潮的调查研究已有不少J,但侧重点均在物理、化学方面,至今未有关于细菌的报道。赤潮水样中存在哪些细菌在国内未见任何报道。本研究从2007年1月12日厦门同安湾湾口靠近五通一侧的海域发生的中肋骨条藻(Skeletonemacostatum)赤潮水样中分离与鉴定细菌,对该次赤潮水样中的细菌进行培养、分离和纯化,并对菌株的形态、生理生化特征及鉴定结果进行分析,从而鉴定出菌种,为研究赤潮水样中的细菌提供基础数据。1材料与方法1.1样品采集依据《海洋赤潮监测技术规程》¨,赤潮现场人工监测的采样频率为每天一次,采样时间选择在一天中叶绿素、DO、pH三要素的最高值时段(依据我单位水质自动监测浮标的实时数据),用无菌采样瓶按《海洋监测第七部分:近海污染生态调查和生物监测》¨采集离水面约lOcm处海水水样,采样站点如图1,1号站为浮标位置,2号站为细菌采样点。1.2细菌培养水样按每100mL加1mL(1+2000)吐温8O溶液,充分摇匀,使样品中的细菌细胞分散成单一细胞。以无菌收稿日期:2007—12-28,修订日期:2008-03—10作者简介:戴红(1978一),女,助理工程师,从事海洋微生物研究。维普资讯http://www.cqvip.com增刊1戴红:厦门同安湾赤潮水样中细菌的分离鉴定增4324。24。24E图1同安湾赤潮采样站点Fig.1Distributionofredtidestations操作方法吸取1mL水样注入盛有9mL灭菌陈海水的试管内混匀,并依同法依次连续稀释至所需要的稀释度。取稀释好的水样0.1mL,滴人制好的2216E平皿上,用灭菌玻璃刮棒将菌液涂抹均匀,平放于超净工作台上20~30min,使菌液渗入培养基。将此平皿置25~C恒温箱内培养2~7d。1.3细菌分离与纯化取菌落数在30—300个之间而且菌落之间分离生长较好的平皿,无菌操作挑选不同形态、颜色的菌落,在2216E培养基上进行平板划线分离,将此平皿置25~C恒温箱内培养2~7d。经3—5次的平板划线分离后如果菌落形态、颜色较一致,则进行革兰氏染色后镜检(由于从微生物群体中经分离生长在平...