厦门同安湾赤潮水样中细菌的分离鉴定VIP专享VIP免费

第27卷增刊12008年4月海洋环境科学MARINEENVIRONMENTALSCIENCEVo1．27，Supp．1April．2008厦门同安湾赤潮水样中细菌的分离鉴定戴红(厦门市海洋与渔业环境监测站，福建厦门361005)摘要：从2007年厦门同安湾冬季中肋骨条藻赤潮的水样中分离鉴定细菌。结果表明：通过培养、分离、纯化、革兰氏染色与镜检，确认分离出革兰氏阴性杆菌；由法国梅里埃品牌ATBExpression自动细菌鉴定仪进行细菌自动鉴定，最终鉴定出菌株2株一腔隙莫拉氏菌和大肠埃希氏菌，这2株菌株均为条件致病菌。关键词：同安湾；赤潮；细菌；分离；鉴定中图分类号：Q936文献标识码：A文章编号：1007-6336(2008)增刊1-0042-03IsolationandIdentificationofmicrobefromredtideinTong’anbay，XiamenDAIHong(XiamenMarine＆FisheriesEnviornmentalMonitoringStation，Xiamen361005，China)Abstract：Basedonthemicrobedata，themicrobeswereisolatedandidentifiedfromaSkeletonemacostatumredtideinTong~nbay，Xiameninwinterin2007．TheresultsshowedthatMoraxellalacunataandEscherichiacaliweridentifiedfromsamplesbycuhiva—ting，separating，sublimating，Gramstaining，observingbyamicroscopeandidenti~ingbyATBExpressionmicrobesAutomatism．Keywords：Tong’anbay；redtide；microbe；isolation；identification近年，随着赤潮的深入研究，细菌正引起人们的重视，国内外不断有关于菌藻关系的研究报道“J。细菌在自然生态系统中作为分解者具有不可忽视的作用，细菌在海洋有机质(特别是难分解的复杂有机物)的分解和无机营养再生的过程中起着很重要的作用，为赤潮藻类的生长提供营养盐和必要的生长因子。细菌也可以通过直接或间接的作用抑制藻类的生长，甚至裂解藻细胞，从而表现为杀藻效应J。因此，在赤潮水样中分离鉴定出细菌菌株，一方面可抑制对赤潮生物有促成作用的细菌进而治理赤潮，另一方面可利用抑制藻类生长的细菌治理赤潮。厦门作为一个旅游观光业发达的海湾城市，人们与海水有较多的接触，对海水中特别是在赤潮中的有害菌需有特别关注。因此对赤潮水样中细菌的分离与鉴定有其重要的意义。有关厦门海域赤潮的调查研究已有不少J，但侧重点均在物理、化学方面，至今未有关于细菌的报道。赤潮水样中存在哪些细菌在国内未见任何报道。本研究从2007年1月12日厦门同安湾湾口靠近五通一侧的海域发生的中肋骨条藻(Skeletonemacostatum)赤潮水样中分离与鉴定细菌，对该次赤潮水样中的细菌进行培养、分离和纯化，并对菌株的形态、生理生化特征及鉴定结果进行分析，从而鉴定出菌种，为研究赤潮水样中的细菌提供基础数据。1材料与方法1．1样品采集依据《海洋赤潮监测技术规程》¨，赤潮现场人工监测的采样频率为每天一次，采样时间选择在一天中叶绿素、DO、pH三要素的最高值时段(依据我单位水质自动监测浮标的实时数据)，用无菌采样瓶按《海洋监测第七部分：近海污染生态调查和生物监测》¨采集离水面约lOcm处海水水样，采样站点如图1，1号站为浮标位置，2号站为细菌采样点。1．2细菌培养水样按每100mL加1mL(1+2000)吐温8O溶液，充分摇匀，使样品中的细菌细胞分散成单一细胞。以无菌收稿日期：2007—12-28，修订日期：2008-03—10作者简介：戴红(1978一)，女，助理工程师，从事海洋微生物研究。维普资讯http://www.cqvip.com增刊1戴红：厦门同安湾赤潮水样中细菌的分离鉴定增4324。24。24E图1同安湾赤潮采样站点Fig．1Distributionofredtidestations操作方法吸取1mL水样注入盛有9mL灭菌陈海水的试管内混匀，并依同法依次连续稀释至所需要的稀释度。取稀释好的水样0．1mL，滴人制好的2216E平皿上，用灭菌玻璃刮棒将菌液涂抹均匀，平放于超净工作台上20～30min，使菌液渗入培养基。将此平皿置25~C恒温箱内培养2～7d。1．3细菌分离与纯化取菌落数在30—300个之间而且菌落之间分离生长较好的平皿，无菌操作挑选不同形态、颜色的菌落，在2216E培养基上进行平板划线分离，将此平皿置25~C恒温箱内培养2～7d。经3—5次的平板划线分离后如果菌落形态、颜色较一致，则进行革兰氏染色后镜检(由于从微生物群体中经分离生长在平...