人卵巢癌裸鼠移植腹水瘤模型的建立VIP免费

·基础研究·人卵巢癌裸鼠移植腹水瘤模型的建立陈爱平①高国兰王和彭芝兰白绍槐本课题受国家自然科学基金和CMB基金资助(批准号39470721)作者单位:610041华西医科大学附二院妇产科(陈爱平、高国兰、王和、彭芝兰、白绍槐),①现工作单位为青岛大学医学院附属医院妇产科【摘要】目的建立人卵巢癌裸鼠移植腹水瘤模型,为研究人卵巢癌发病机制、生物学特性以及转移方式提供工具。方法将1例人卵巢癌的腹水直接接种于裸鼠腹腔,观察裸鼠腹水形成以及肿瘤生长和转移情况,做腹水细胞学计数、涂片以及染色体和肿瘤标志物的检查,肿瘤和器官作病理学检查。结果成功建成1个人卵巢癌裸鼠移植腹水瘤模型,并己传至第18代,传代移植成功率100.0%,组织学和超微结构形态证实,保持了原人卵巢癌特征,具有人类肿瘤染色体特征,有淋巴结转移行为,可在体外培养并传代。结论本研究所建立的人卵巢癌腹水瘤裸鼠移植腹水瘤模型与患者临床情况相似,通过对40只裸鼠的实验观察,该方法稳定可靠。【关键词】人卵巢癌;裸鼠移植;腹水瘤;模型中图分类号:R737.31;R73-35文献标识码:A文章编号:1001-5930(2000)02-0113-03TransplantableAscitesTumorModelsofHumanOvarianCarcinomainNudeMiceCHENAi-ping,GAOGuo-lan,WANGHe,etal.DepartmentofObstetricsandGyneeology,TheSecondAffiliatedHospital,WestChinaUniversityofMedicalScience,Chengdu,610041【Abstract】ObjectiveToestablishatransplantableascitestumormodelofhumanovariancarcinomainnudemice.MethodsTumorascitesofhumanovariancarcinomaweredirectlyimplantedperitoneallyintonudemice.Productionofascitesandmetasta-sisandmorphologicalcharacteristicsoftransplantedtumorwerestudiedbylightmicroscopy,andelectronmicroscopy.Chromsomeandtumormarkerwerealsoanalysed.ResultsOnetransplantedascitestumorwasestablishedsuccessfullyandithadbeenpassagedinvivofor18generations.Themorphologicalcharacteristics,chromsomalkaryotypeandtumormarkerweresimilartotheoriginalhumanovariancarcinoma.ConclusionThemodelprovideusefultoolforthestudyofhumanovarlancarcinoma.【Keywords】Humanovariancarcinoma;Ascitestransplanted;Ascitestumor;Nudemicemodel(ThePracticalJournalofCancer,2000,15:113～115)建立裸鼠卵巢癌腹腔播散模型,是深入研究卵巢癌生物机制和治疗方法的基础工作。我们于1998年9月,将1例卵巢癌并腹水患者的腹水标本,直接接种于裸鼠腹腔,建立了人卵巢癌裸鼠移植腹水瘤模型。已传至第18代,现报告如下。1材料和方法1.1人体肿瘤标本来源病例为1例44岁卵巢癌患者,临床分期为Ⅲc期,双侧卵巢肿块伴大量腹水和盆腔内有广泛转移癌结节。病理诊断为双侧卵巢浆液性乳头状囊腺癌(低分化型)。1.2实验动物BULB/C(nu/nu)裸小鼠,由华西医科大学动物中心提供,鼠龄4～12周,雌鼠。实验鼠饲养于无菌室的净化空气层流架中。室内定期进行紫外线照射,笼、垫料、饮水、饲料均高压消毒。1.3移植方法手术中取腹水45ml置于消毒离心管内,离心后留取沉淀,以空针吸取并注入裸鼠腹腔,接种工作在标本离心后40min内完成。1.4模型检测①定期观察裸鼠腹部膨胀及消瘦情况。②处死裸鼠及对自然死亡的裸鼠作尸体解剖,腹水做细胞学涂片检查及细胞学计数,腹腔内肿瘤及器官作病理学检查。③腹水作染色体检查。④裸鼠血及腹水作肿瘤标志物检测。⑤体外培养:第8、第12代移植腹水,将腹水瘤瘤细胞计数后,接种于培养瓶内,加入含10%胎牛血清的RPMI1640培养液内,置37℃恒温箱内培养。·113·实用癌症杂志2000年3月第15卷第2期ThePracticalJournalofCancer,March2000,Vol.15,No.22结果2.1裸鼠卵巢癌腹水瘤模型移植成功率及传代移植生长特性原代裸鼠于腹水接种后第40天产生腹水,以后腹部膨胀明显,腹围迅速增大,裸鼠60天消瘦明显并出现恶病质,濒临死亡时以脊椎脱臼法处死裸鼠。取其腹水接种下一批裸鼠,行鼠间传代,剩余腹水留作细胞学涂片和计数,并作肿瘤标志物检查。本模型已经连续传至第18代,共移植裸鼠40只,移植成功率100.0%,腹腔传代间隔24～70天不等,平均44天。各代转种鼠腹水接种细胞...