糖类的毛细管电泳及芯片毛细管电泳VIP免费

收稿日期：!""#$"#$"%基金项目：国家自然科学面上基金（!&&’("%"）、重点基金（!""%("#"）资助项目，中国科学院“寡糖工程”知识创新资助项目作者简介：毛秀丽（#&’’$），女，硕士研究生。通讯联系人：林炳承，研究员，博士生导师，)$*+,-：./-,01*234,/53+/3/0!!!!!!!!!!!!!!!!!!""""。文献综述糖类的毛细管电泳及芯片毛细管电泳毛秀丽，林炳承（中国科学院大连化学物理研究所，辽宁大连##6"!%）摘要：糖类化合物在生物体内发挥多方面的作用。糖研究的复杂性在于其结构的复杂多变。高效毛细管电泳作为一种快速、高效的分离分析手段已广泛应用于糖的研究。芯片毛细管电泳是近几年来发展起来的新的分析技术，并已经在生命科学的研究中得到较广泛的应用。就各种糖类化合物的毛细管电泳的分析策略、检测条件及糖类化合物的芯片毛细管电泳进行了阐述，共引用文献78篇。关键词：毛细管电泳；芯片毛细管电泳；糖类化合物中图分类号：96(8文献标识码：:文章编号：#"""$8’#%（!""#）"7$"%"&$"(!引言糖类化合物是生物体的组成物质，从细菌到高等动物的机体内都含有糖。早在#""年前德国著名的科学家;,2/<=>就开始对糖进行研究。一个世纪过去了，糖类的研究尽管有了较大的进展，但与蛋白质、核酸研究的飞跃式发展相比较，仍显得很落后。之所以如此，有两方面的原因，一是糖类的结构比蛋白质和核酸要复杂得多，对它们的研究受分析、检测技术的限制难以深入；二是早年发现的糖类的功能比较单调，仅认为糖类是提供能量的物质。近%"年来，随着分离、检测技术的发展，糖类化合物再度引起人们的兴趣，特别是糖类的代谢产物的分析、糖蛋白中寡糖链的结构和功能的研究、糖蛋白的微观不均一性都有非常重要的意义，因此，以糖类为研究重点的糖工程被认为是继基因工程、蛋白质工程后生物化学和分子生物学中重要的研究领域［#］。!""#年《?/,=0/=》（!&#卷）上发表的关于糖类研究的专辑具体地体现了学术界的这一认识。各种色谱技术及传统电泳技术均可用于糖的分析［!@7］。对于较复杂的寡糖，较多采用离子交换色谱脉冲安培检测，但该法存在分离效率低及非专一性响应、需要梯度淋洗等问题，而传统的电泳则仅能分离少数带电荷的寡糖和糖蛋白，存在操作繁琐、无法准确定量及分离效果差等问题。毛细管电泳（A)）技术是!"世纪8"年代发展起来的一种新的分离手段。将A)最早应用于糖的分析是BC04+研究小组于#&8&年提出的。A)所具有的高分离能力、高灵敏度、快速和简便等特点，在糖的分析中已显示出它的优越性。我们也曾分别就糖类毛细管电泳的分析原理、检测和糖蛋白的分析作了综述［(，6］。本文就糖类化合物的毛细管电泳分析策略以及目前用芯片毛细管电泳分析糖类的最新进展进行阐述。"各种糖类化合物的毛细管电泳分析"#!糖类化合物的分离"#!#!单糖和聚糖一般来讲简单的单糖是中性糖，需要将其转化成带电荷的形式进行电泳。由于单糖的5!+值一般大于##，故需选用强碱性的缓冲液（5BD##），使糖基上的羟基去质子而带负电，直接进行电泳分离，用紫外（#&(0*）检测。也可以选用硼酸盐缓冲液，硼酸盐与糖基络合形成带负电的络合物以进行电泳分离，用紫外检测。另外，采用紫外或荧光衍生试剂，如!$氨基吡啶、!$氨基喹啉、8$氨基萘$#，%，6$三磺酸（:EF?）等对单糖进行标记，既可以使糖带上一定的电荷，也可以增加检测的灵敏度。聚糖包括寡糖和多糖。简单单糖的分析方法也适于简单寡糖的分析。多糖一般利用酸解或酶解的方法将其转化为寡糖后进行分析。BC0G等［’］利用毛细管凝胶电泳分析了用超声波降解或酶解后的透明质酸的片段。多糖也可以直接在合适的条件下进行电泳，?H=I+022C0等［8］用毛细管电泳分析了以%$（7$羧基苯甲酰基）$!$喹啉羧基醛（AJKA:）标记的纤维素和肝素，但这方面的报道不多。"#!#"复合多糖糖蛋白及其糖型：糖蛋白是糖链与蛋白质通过共价键连接形成的化合物，其连接方式有两种，一种是糖链和天冬氨酸连接，称为E$连接糖蛋白；另一种是糖链和丝氨酸或苏氨酸连接，称为9$连接糖蛋白。糖蛋白的毛细管电泳分析方法有两种，一种是用酶解或酸解的方法将糖链从糖复合物上解离下第#&卷第7期!""#年’月...