支气管肺泡灌洗液及胸腔积液中MAGE-3 mRNA的表达在良、恶性胸腔积液鉴别诊断中的价值VIP免费

胸腔积液及支气管肺泡灌洗液中胸腔积液及支气管肺泡灌洗液中胸腔积液及支气管肺泡灌洗液中胸腔积液及支气管肺泡灌洗液中MAGE-3MAGE-3MAGE-3MAGE-3mRNAmRNAmRNAmRNA的的的的表达在良、恶性胸腔积液鉴别诊断中的价值表达在良、恶性胸腔积液鉴别诊断中的价值表达在良、恶性胸腔积液鉴别诊断中的价值表达在良、恶性胸腔积液鉴别诊断中的价值※※※※刘静，岳红梅，吕燕兰州大学第一医院呼吸科，甘肃兰州730000E-mail:ices200501@126.com摘要：摘要：摘要：摘要：目的：研究MAGE-3基因mRNA在支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolarlavagefluid，BLF）及胸腔积液（pleuraleffusion，PE）中的表达，并探讨MAGE-3基因作为良、恶性胸腔积液鉴别诊断指标的可能性。方法：采用巢式逆转录-聚合酶链反应（nRT-PCR）方法，检测35例患者（25例恶性，10例良性）胸腔积液及支气管肺泡灌洗液中的MAGE-3表达的情况。结果：良性胸腔积液患者组中，胸腔积液及支气管肺泡灌洗液中的MAGE-3表达均为阴性。恶性胸腔积液患者组中，胸腔积液中MAGE-3表达的阳性率为56％，而支气管肺泡灌洗液中MAGE-3表达的阳性率为76％；其中2例患者胸腔积液中MAGE-3基因表达阳性，支气管肺泡灌洗液中表达阴性，7例患者支气管肺泡灌洗液中MAGE-3基因表达阳性，胸腔积液中基因表达阴性；而12例患者胸腔积液和支气管肺泡灌洗液中MAGE-3基因表达均为阳性。联合检测胸腔积液和支气管肺泡灌洗液中MAGE-3基因的表达阳性率为84％，较单一检测胸腔积液中基因表达率提高，且差异有统计学意义（P=0.031<0.05）。结论：联合检测胸腔积液及支气管肺泡灌洗液中MAGE-3基因mRNA的表达，可以作为鉴别良恶性胸腔积液的一个指标。关键词：关键词：关键词：关键词：肺癌；MAGE-3基因；胸腔积液；支气管肺泡灌洗液；巢式逆转录-聚合酶链反应中图分类号中图分类号中图分类号中图分类号R7342引言胸腔积液是一种常见临床征象，临床上可分为漏出液和渗出液。漏出液大多数是由良性疾病引起的，常见的病因为充血性心力衰竭、肝硬化、肾病综合征。渗出液最常见的病因为恶性肿瘤、结核性胸膜炎、细菌性肺炎。其中，结核性胸腔积液和恶性胸腔积液发病率较高，鉴别十分困难。此外胸腔积液的诊断与治疗、预后密切相关。目前，临床上常见的鉴别方法是脱落细胞检查找癌细胞，但其阳性率不高，易导致漏诊。因此，目前尚需一种敏感、特异、方便的方法来鉴别良恶性胸腔积液。黑色素瘤抗原(melanoma-associatedantigen,MAGE)是Van等[1]于1991年在黑色素瘤细胞系中首次发现，是一种新的肿瘤特异性抗原(tumor-specificitiedantigen,TSA)。MAGE基因通常只在睾丸、胎盘[2][3][4]等少数正常组织中表达，而在多数肿瘤组织中有异常高※本研究受甘肃自然科学基金暨中青年科技项目（3ZS051-A25-082）资助1http://www.paper.edu.cn表达。许多MAGE家族基因被报道在肺癌组织中有表达[5][6][7][8][9][10][11]。Jong-Rung等研究报道[12]，肺癌组织中MAGE表达阳性率达88％。Jang.SJ[13]对早期非小细胞肺癌及未患肺癌且有吸烟史的正常人行支气管刷检，发现两者MAGE基因表达均上调。本实验研究MAGE-3基因mRNA在支气管肺泡灌洗液及胸腔积液中的表达，并探讨MAGE-3基因作为良、恶性胸腔积液鉴别诊断指标的可能性。1材料与方法1.1材料1.1.1临床资料2007年2月－2007年10月兰州大学第一医院收住的35例住院患者的胸腔积液及支气管肺泡灌洗液。其中男性19例，女性16例；患者年龄21～78岁，平均年龄49岁。经组织病理学（纤维支气管镜活检、经皮肺活检、胸膜活检、淋巴结活检、术后经病理证实等）、胸腔积液细胞学诊断恶性胸腔积液25例，其中包括肺癌21例（包括鳞癌9例、腺癌7例、腺鳞癌1例、大细胞未分化癌3例、小细胞未分化癌1例），转移卵巢癌2例，转移前列腺癌2例；根据病史、体征、胸部X线、胸腔积液化验及诊断性治疗并经随访胸液完全吸收等诊断为良性胸腔积液10例，其中结核性胸膜炎7例，肺炎3例；1.1.2主要试剂所用试剂Trizol裂解液、AMV第一链cDNA合成试剂盒、TaqDNA聚合酶、LowMWDNAmarker-A等均购自上海生工生物工程服务有限公司，其他分析试剂为国产分析纯。1.1.3引物设计与合成参照GenBa...