微生物实验指导生物工程学院编2004年9月第一部分基本知识课程目的与任务学生实验守则微生物学实验室常用的器皿微生物实验室常用显微镜微生物实验室常用消毒灭菌方法第二部分基础实验实验一环境微生物的检测实验二光学显微镜的使用实验三细菌的单染实验四革兰氏染色法实验五细菌芽孢染色法实验六培养基的配制和灭菌实验七微生物的直接镜检记数法基本接种方法与主要微生物菌落形态的观察实验八微生物的培养特征实验九微生物的分离纯化实验十大肠杆菌生长曲线测定实验十一厌氧菌的培养技术实验十二菌种保藏法第三部分应用实验实验十三大分子物质的水解实验十四抗生素效价的生物测定试验实验十五IMVIC与硫化氢试验实验十六微量简易诊检系统实验十七吞噬作用实验十八抗原与免疫血清的制备实验十九牛乳中细菌的检查实验二十牛乳在自然发酵与酸败过程中细菌的生态学演变酸奶发酵过程的分析检测第四部分附录附录I染色液的配制附录II培养基的配制附录III试剂和溶液的配制附录IVDIGLIB2.0使用手册课程目的和任务本课程的目的：训练学生掌握微生物学最基本的操作技能；了解微生物学的基本知识；加深理解课堂讲授的某些微生物学理论。同时，通过实验，培养学生观察、思考、分析问题和解决问题的能力；实事求是、严肃认真的科学态度以及勤俭节约、爱护公物的良好作风。本课程的主要任务：1、掌握显微镜的基本构造，并能正确、熟练操作。2、通过对细菌、放线菌、酵母菌、霉菌等微生物的个体形态及菌落特征的观察，掌握对它们进行初步鉴别的知识。3、掌握常用的几种微生物接种以及菌种保存的基本方法。4、微生物单染及革兰氏染色方法，以及其在微生物鉴别上的应用5、掌握培养基的配制与灭菌、纯种分离、以及微生物的镜检计数等基本技能。6、掌握菌落总数、细菌总数及微生物增殖曲线的测定方法，以及在发酵生产中的应用。学生实验守则1．每次实验前必须对实验内容进行充分预习，以了解实验的目的、原理和方法，做到心中有数，思路清楚。2．认真及时做好实验记录，对于当时不能得到结果而需要连续观察的实验，则需记下每次观察的现象和结果，以便分析。3．实验室内应保持整洁，勿高声谈话和随便走动，保持室内安静。4．实验时小心仔细，全部操作应严格按操作规程进行，万一遇有盛菌试管或瓶不慎打破、皮肤破伤或菌液吸入口中等意外情况发生时，应立即报告指导教师，及时处理，切勿隐瞒。5．实验过程中，切勿使酒精、乙醚、丙酮等易燃药品接近火焰。如遇火险，应先关掉火源，再用湿布或沙土掩盖灭火。必要时用灭火机。6．使用显微镜或其他贵重仪器时，要求细心操作，特别爱护。对消耗材料和药品等要力求节约，用毕后仍放回原处。7．每次实验完毕后，必须把所用仪器抹净放妥，将实验室收拾整齐，擦净桌面，如有菌液污染桌面或其他地方时，可用3％来苏尔液或5％石炭酸液覆盖其上半小时后擦去，如系芽孢杆菌，应适当延长消毒时间。凡带菌之工具（如吸管、玻璃刮棒等）在洗涤前须浸泡在3％来苏尔液中进行消毒。8．每次实验需进行培养的材料，应标明自己的组别及处理方法，放于教师指定的地点进行培养。实验室中的菌种和物品等，未经教师许可不得携出室外。9．每次实验的结果，应以实事求是的科学态度填入报告表格中，力求简明准确，并连同思考题及时汇交教师批阅。10．离实验室前应将手洗净，注意关闭门窗、灯、火、煤气等。微生物学实验室常用的器皿微生物学实验室所用的玻璃器皿，大多要进行消毒、灭菌和用来培养微生物，因此对其质量、洗涤和包装方法均有一定的要求。一般，玻璃器皿的质量要求硬质玻璃，才能承受高温和短暂烧灼而不致破损；器皿的游离碱含量要少，否则会影响培养基的酸碱度；对玻璃器皿的形状和包装方法的要求，以能防止污染杂菌为准；洗涤方法不恰当也会影响实验结果。本节将对这几方面作详细介绍。一、器皿的种类、要求与应用1.试管（testtube）微生物学实验室所用玻璃试管，其管壁必须比化学实验室用的厚些，这样在塞棉花塞时，管口才不会破损。试管的形状要求没有翻口（图1-1,A）,不然，微生物容易从棉塞与管口的缝隙间进入试管（图I-1,B）而造成污染。此外，现在有不用棉塞而用铝...
