1微生物的实验室培养微生物的实验室培养第二课时——纯化大肠杆菌2温故而知新一、培养基定义成分种类二、无菌技术方法内容消毒灭菌操作空间、操作者的手培养器皿、接种用具、培养基在酒精灯火焰附近操作避免已灭菌的材料用具与周围物品接触温故而知新温故而知新温故而知新3巩固检测巩固检测巩固检测1、甲、乙、丙是三种微生物，下表①、②、③是用来培养微生物的三种培养基。甲、乙、丙都能在③中正常生长繁殖；甲能在①中正常生长繁殖，而乙和丙都不能；乙能在②中正常生长繁殖，甲、丙都不能。下列说法正确的是：粉状硫10gK2HPO44gFeSO40.5g蔗糖10g（NH）2SO40.4gH2O100mLMgSO49.25gCaCI20.5g①++++-+++②+++-++++③++++++++A、甲乙丙都是异养微生物B、甲乙都是自养微生物、丙是异养微生物C、甲是固氮微生物、乙是自养微生物、丙是异养微生物D、甲是异养微生物、乙是固氮微生物、丙是自养微生物4巩固检测巩固检测巩固检测2、培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌、消毒方法依次是：①化学消毒②灼烧灭菌③干热灭菌④紫外线灭菌⑤高压蒸汽灭菌⑥巴氏消毒法A、⑤③②①④⑥B、①②③④⑤⑥C、⑥②③④①⑤D、③④②①⑥⑤5新课：新课：三、纯化大肠杆菌实验目的：实验目的：接种大肠杆菌于培养基上，经过培养使其形成由单个细胞繁殖形成的子细胞群体，即菌落。实验过程：实验过程：((知识网络）知识网络）配制培养基配制培养基接种大肠杆菌接种大肠杆菌恒温培养箱中培养（恒温培养箱中培养（12—2412—24hh））结果分析与评价结果分析与评价计算→称量→溶化→灭菌→倒平板计算→称量→溶化→灭菌→倒平板调调PH→PH→分装→包分装→包扎扎菌种保藏菌种保藏平板划线平板划线稀释涂布平板稀释涂布平板未接种的培养（对照组）未接种的培养（对照组）接种的培养（实验组）接种的培养（实验组）培养基配制成功与否？培养基配制成功与否？接种操作成功与否？接种操作成功与否？6配制培养基配制培养基•①在火焰旁右手拿锥形瓶，左手拔出棉塞；•②右手拿锥形瓶，使锥形瓶的瓶口迅速通过火焰；•③左手将培养皿打开一条缝隙，右手将培养基倒入培养皿，立刻盖上皿盖。•④待平板冷却凝固后，将平板倒过来放置。倒平板过程总结：倒平板过程总结：7配制培养基配制培养基分析：分析：1、培养基高压蒸汽灭菌后，需冷却到____℃左右时，才能倒平板。用什么办法来估计培养基的温度？_____________________________________________________________2、操作时锥形瓶口通过酒精灯火焰的目的是：_____________________________________________________________3、将平板倒置的目的是：_________________________________________________________________________________________________________________________4、在倒平板过程中，将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？_____________________________________________________________5050感觉锥形瓶的温度刚刚不烫手，就可以倒平板了感觉锥形瓶的温度刚刚不烫手，就可以倒平板了防止瓶口微生物污染培养基防止瓶口微生物污染培养基既可以使培养基表面冷凝的水分更好的挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入既可以使培养基表面冷凝的水分更好的挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染培养基，造成污染不能，因为空气中的微生物可能在皿盖和皿底之间的培养基上滋生。不能，因为空气中的微生物可能在皿盖和皿底之间的培养基上滋生。8平板划线接种平板划线接种•原理•通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面。9平板划线接种平板划线接种灼烧接种环冷却划线（第一区域）蘸取菌液灼烧接种环冷却划线（第二区域）灼烧接种环冷却划线（第三区域）灼烧接种环冷却划线（第四区域）灼烧接种环冷却划线（第五区域）灼烧接种环平板倒置放置培养10平板划线接种平板划线接种第一区域第二区域第三区域第四区域第五区域11问题2：每次划线前灼烧接种环的目的：问题3：划线结束后灼烧接种环的目的：平板划线接种平板划线接种答案：避免...
