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课题3-分解纤维素的微生物的分离-(2)VIP免费

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纤维素:棉花是自然界中纤维素含量最高的天然产物;纤维素是地球上含量最丰富的多糖类物质,植物每年产生的纤维素超过70亿吨;分布植物的根、茎、叶中;基础知识1.1.纤维纤维素素纤维素是一种由纤维素是一种由葡萄糖葡萄糖首尾相连而成首尾相连而成的的高分子高分子化合物,是含量最丰富的化合物,是含量最丰富的多糖多糖类物质。类物质。土壤中某些微生物能够产生土壤中某些微生物能够产生纤维素酶,,把纤维素分解为葡萄糖,后再利用把纤维素分解为葡萄糖,后再利用。。2.2.纤维素酶纤维素酶纤维素酶是一种纤维素酶是一种复合酶复合酶,一般认为它,一般认为它至少包至少包括三种组分括三种组分,即,即CC11酶酶((外切酶外切酶))、、CCXX酶酶((内切内切酶酶))和葡萄糖苷酶和葡萄糖苷酶,前两种酶使纤维素分解成,前两种酶使纤维素分解成纤维二糖,第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。纤维二糖,第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。纤维二糖C1酶、Cx酶葡萄糖苷酶葡萄糖纤维素基础知识滤纸崩溃法体会纤维素酶作用的实验:(2)纤维素分解菌的筛选1、筛选纤维素分解菌的方法______________。该方法可以通过________反应直接筛选。刚果红染色法颜色2、其原理是:刚果红可以与纤维素形成____________,当纤维素被_________分解后,红色复合物无法形成,出现以_____________为中心的________,可以通过___________________________来筛选纤维素分解菌。红色复合物纤维素酶纤维素分解菌透明圈是否产生透明圈可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌练一练:1.下列关于纤维素酶的说法,错误的是A.纤维素酶是一种复合酶,至少包括三种B.纤维素酶可把纤维素分解成葡萄糖C.纤维素酶可用于去掉植物的细胞壁D.葡萄糖苷酶可把纤维素分解成葡萄糖2.利用刚果红法可以筛选出纤维素分解菌,下列说法错误的是A.刚果红能与纤维素形成红色复合物B.刚果红能与纤维二糖形成红色复合物C.刚果红不能与葡萄糖形成红色复合物D.若培养基上产生了透明圈,则说明已筛选出了纤维素分解菌实验设计土壤取样选择培养梯度稀释将样品涂布到鉴别培养基挑选菌落什么样的环境取样?①培养的目的?②选择培养基的特点?①鉴别培养基的特点?②如何鉴别?根据:微生物对生存环境的要求,到相应环境中去找;目的:增加纤维素分解菌的浓度,以确保能够从样品中分离到所需要的微生物;刚果红染色法培养基组成提供的主要营养物质CMC-Na5~10g碳源酵母膏1g碳源、氮源、生长因子KH2PO40.25g无机盐土豆汁100mL碳源、生长因子琼脂15g凝固剂上述物质溶解后,加蒸馏水定容至1000mL氢元素、氧元素鉴别纤维素分解菌的培养基(水溶性羧甲基纤维素钠)【资料三】刚果红染色法方法一:先培养微生物,再加入刚果红进行颜色反应方法二:在倒平板时就加入刚果红染色法优点缺点方法一方法二颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用操作繁琐,刚果红会使菌落之间发生混杂操作简便,不存在菌落混杂问题产生淀粉酶的微生物也产生模糊透明圈,有些微生物能降解色素,形成明显的透明圈。思考:这两种方法各有哪些优点与不足实验设计土壤取样选择培养梯度稀释将样品涂布到鉴别培养基挑选菌落什么样的环境取样?①培养的目的?②选择培养基的特点?挑选什么样的菌落?①鉴别培养基的特点?②如何鉴别?根据:微生物对生存环境的要求,到相应环境中去找;目的:增加纤维素分解菌的浓度,以确保能够从样品中分离到所需要的微生物;刚果红染色法挑选产生透明圈的菌落挑取产生明显的透明圈的菌落,一般即为分解纤维素的菌落。接种到纤维素分解菌的选择培养基上,在300C-370C培养,可获得纯培养。选择培养的操作方法将土样加入装有30ml选择培养基的锥形瓶中,将锥形瓶固定在摇床上,在一定温度下震荡培养1~2天,直至培养液变浑浊。也可重复选择培养。〖旁栏思考题〗为什么选择培养能够“浓缩”所需的微生物?在选择培养的条件下,可以使那些能够适应这种营养条件的微生物得到迅速繁殖,而那些不适应这种营养条件的微生物的繁殖被抑制,因此可以起到“浓缩”的作用。指微生物的种类少了,而某些微生物的数量多了结果分析与评价1.培养基的制作是否合格以及选择培养基是否筛选出菌落...

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