了解有关微生物及培养基的基础知识,进行无菌技术的操作,进行微生物的培养。一、课题目标:掌握培养基的制备、高压蒸气灭菌和平板划线法等基本操作技术,熟练、规范地进行无菌操作,成功地培养微生物。无菌技术的操作。二、课题重点和难点:三、技能目标:微生物包括哪五类:病毒病毒细菌细菌放线菌放线菌真菌原生动物特点:结构简单,形体微小.通常要用光学显微镜或电子显微镜才能看到,有的甚至没有细胞结构.且体内一般不含有叶绿素.不能进行光合作用.原核生物界原生生物界真菌界病毒界一、基础知识:(一)微生物细菌的外形与大小细菌:单细胞不分枝的原核微生物。细菌细胞微小而透明微小而透明,通常用适当染料染色染色后显微镜观察图1-1常见的三种细菌典型形态A.球菌B.杆菌C.弧菌细菌细胞由外向里依次有鞭毛鞭毛、菌(纤)毛纤)毛、荚膜荚膜、细胞壁细胞壁、细胞膜、细胞膜、细胞质细胞质,细胞质细胞质中又有液泡、储中又有液泡、储存性颗粒、核质存性颗粒、核质等等。细菌的构造图图1-31-3细菌的结构细菌的结构*细胞壁•结构特点:坚韧且有弹性结构特点:坚韧且有弹性•细胞壁有哪些功能?•①固定细胞外形;固定细胞外形;②②保护细胞免受外力的损伤;保护细胞免受外力的损伤;③③阻拦大分子物质进人细胞阻拦大分子物质进人细胞;;④④使细胞具有致病性及对噬使细胞具有致病性及对噬菌体的敏感性菌体的敏感性。。伤寒杆菌细胞壁中含毒素有些细菌在一定的条件下,细胞里面形成一个椭圆形的休眠体,叫做芽孢。芽孢的壁很厚,对干旱、低温、高温等恶劣的环境有很强的抵抗力。例如,有的细菌的芽孢,煮沸3小时以后才死亡。芽孢又小又轻,可以随风飘散。当环境适宜(如温度、水分适宜)的时候,芽孢又可以萌发,形成一个细菌.菌落:•单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时,就会形成一个肉眼可见的,具有一定形态结构的子细胞群体,叫做菌落。•菌落是鉴定菌种的重要依据。菌落细菌的菌落特征因种而异细菌的营养类型•根据细菌所利用的能源和碳源的不同,将细菌分为两大营养类型。•自养菌:分类,举例?•异养菌:•腐生菌•寄生菌大部分病原菌光合自养型:光合细菌化能自养型:硝化细菌,铁细菌,硫细菌放线菌放线菌1、结构:单细胞原核分支状的菌丝(基内菌丝、气生菌丝)链霉素、土霉素、四环素、氯霉素、红霉素、庆大霉素微生物中发现了几千种抗生素,其中2/3是由放线菌产生的应用:病毒的结构2、病毒的增殖:真菌一、基础知识:(二)培养基培养基(培养液)是由人工方法配制而成的,专供微生物生长繁殖使用的混合营养液。(1)按物理状态分:固体培养基和液体培养基、半固体培养基。其中固体培养基用于菌种保存及分离、鉴定菌落、活菌计数等,半固体培养基可观察微生物的运动,液体培养基常用于发酵工业。(2)按功能分:选择培养基和鉴别培养基。(3)按成分分:天然培养基和合成培养基。1.培养基的类型和用途选择培养基加入青霉素的培养基:分离酵母菌、霉菌等真菌加入高浓度食盐的培养基:分离金黄色葡萄球菌不加氮源的无氮培养基:分离固氮菌不加含碳有机物的无碳培养基:分离自养型微生物加入青霉素等抗生素的培养基:分离导入了目的基因的受体细胞加入氨基喋呤、次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷的培养基:分离杂交瘤细胞天然培养基有血清、血浆、和组织提取液(如鸡胚和牛胚浸液)。优点:营养成分丰富,培养效果好缺点:来源受限;成分复杂,影响对某些实验产物的提取和实验结果的分析;易发生支原体污染;根据细胞生存所需物质的种类和数量,用人工方法模拟合成的。合成培养基主要成分是氨基酸、维生素、碳水化合物、无机盐和其它一些辅助物质。优点:标准化生产,组分和含量相对固定;成本低缺点:缺少某些成分,不能完全满足体外细胞生长需要。合成培养基:天然培养基:血清中含有:①多种蛋白质(白蛋白、球蛋白、铁蛋白等)②多种金属离子;③激素;④促贴附物质,如纤粘蛋白、冷析球蛋白、胶原等。⑤各种生长因子⑥转移蛋白⑦不明成分人工合成培养基只能维持细胞生存,要想使细胞生长和繁殖,还需补充一定量的天然培养基(如血清)。液体培养基:表面生长均匀混浊生长沉...