第三讲植物组织培养和酶的研究与应用基础知识要打牢[教材知识问题化梳理]一、1.脱分化再分化2.(1)未开花MS培养基植物激素(2)70%酒精无菌水酒精灯火焰火焰灼烧无菌箱3.(1)四分体时期单核期(2)胚状体愈伤组织从芽(3)材料的选择培养基的组成单核二、1.多聚半乳糖醛酸酶果胶分解酶植物细胞壁2.(1)反应速度(2)酶的抑制剂三、(1)物理或化学一定空间内(2)化学结合(3)活化CaCl2溶液海藻酸钠固定化[效果自评组合式设计]一、(1)×(2)×(3)√(4)√(5)×(6)√(7)×(8)√(9)×(10)√二、(1)培养基中激素的种类及其浓度配比。(2)材料的选择与培养基的组成。(3)单核期。(4)醋酸洋红法和焙花青—铬矾法。高频考点要通关[需重点强化的2个重难点]例1：解析：(1)由外植体培养成脱毒苗的过程为植物组织培养过程，需经过脱分化、再分化两个阶段。(2)植物组织的培养常用固体培养基，固体培养基常用的凝固剂是琼脂。植物组织培养时，常用生长素和细胞分裂素启动细胞分裂、脱分化和再分化，当细胞分裂素较多时，利于芽的分化；当生长素较多时，利于根的分化。培养基的彻底灭菌常用高压蒸汽灭菌法。(3)体积分数为70%的酒精杀菌效果最强，操作者和外植体的消毒常用70%的酒精。将愈伤组织分离成单个细胞常用纤维素酶和果胶酶。(4)辣椒素的提取常用有机溶剂，为防止有机溶剂的挥发，提取辣椒素过程中，在萃取加热时需安装冷凝回流装置。答案：(1)脱分化(或去分化)再分化(2)琼脂低高压蒸汽灭菌(3)70%果胶酶(4)防止有机溶剂的挥发例2：解析：选B本题考查探究加酶洗衣粉的洗涤效果实验的基本知识。本实验的自变量是洗衣粉的种类，因变量是洗涤效果，无关变量有温度、pH、衣物质地(因为酶具有专一性)、洗衣粉的用量等，探究实验中除自变量外应给予相同且适宜的其他条件，才能排除无关变量对实验结果的干扰，根据上述分析，符合题意的是B，热水溶解洗衣粉可能使酶失活，只有适宜pH条件下加酶洗衣粉才有好的洗涤效果，故A、C、D均不符合题意。[需特别关注的1个易失分点]选C酶的固定方法通常有化学结合法和物理吸附法，前者可能引起酶分子结构发生改变而改变酶的活性，后者则不会；消化酶在消化道中起作用；尿糖试纸是用来鉴定尿液中是否含有葡萄糖的，只能利用一次；将溶化后的海藻酸钠液冷却至室温，加入已活化的酵母细胞充分搅拌混合均匀后移至注射器中，然后以恒定速度缓慢滴加至CaCl2中而形成凝胶珠，再用无菌水冲洗2～3次，所以无菌水冲洗的目的是洗去CaCl2和杂菌。解题训练要高效1．选A植物组织培养依据的原理是细胞的全能性。培养过程是：离体的植物器官、组织或细胞经脱分化形成愈伤组织，然后经再分化形成根、芽，最终形成植物体。影响植物细胞脱分化产生愈伤组织的一个重要因素是植物激素，当细胞分裂素与生长素比例适中时，能促进愈伤组织的形成。2．选D诱导花粉植株能否成功受多种因素影响，其中材料的选择与培养基的组成是主要的影响因素；如果花药开裂释放出胚状体，则一个花药内就会产生大量幼小植株，必须在花药开裂后尽快将幼小植株分开，分别移植到新的培养基上，否则这些植株将很难分开；从花粉到幼苗阶段，由于无叶绿体，所以不需照光；对一般植物来讲，选择单核期的花药进行培养，成功率最高。3．选C该图示为多因子变量曲线，从图示可以看出本实验的自变量有温度和洗衣粉是否加酶，因变量可能是污渍残留量，温度超过t2后加酶洗衣粉中的酶可能失活。从图示可以看出普通洗衣粉的最佳使用温度为t2，而加酶洗衣粉的最佳使用温度为t1。4．解析：在缺水状态下，微生物处于休眠状态。酵母细胞的活化即让处于休眠状态的酵母细胞恢复正常生活状态。固定化酶和固定化细胞技术是利用物理或化学方法将酶或细胞固定在一定空间的技术，其中固定化细胞一般常采用包埋法，而固定化酶常用化学结合法和物理吸附法。原因是细胞体积大，而酶分子体积小，体积大的细胞难以被吸附或结合，而体积小的酶容易从包埋材料中漏出。海藻酸钠溶解时应小火加热，或小火间断加热，期间还要不断搅拌，防止焦糊。答案：(1)让酵母细胞恢复正常生活(2)化学结合法物理吸附法(3)配制海藻酸钠溶液(4)小火加热(小火间断加热)，不断搅拌(5)固定化酵母细胞数目较少较少海藻酸钠浓度偏高，实验制作失败
