选修3现代生物科技专题第一讲基因工程基础知识要打牢[教材知识问题化梳理]一、1
(1)原核(2)核苷酸序列磷酸二酯键(3)黏性末端2.大肠杆菌黏性末端和平末端3
(1)双链环状DNA分子限制酶标记基因(2)动植物病毒二、(1)基因文库PCR技术(2)启动子标记基因(3)农杆菌转化法花粉管通道法显微注射(4)DNA分子杂交分子杂交抗原—抗体杂交个体生物学水平三、(1)蛋白质结构(3)氨基酸序列[效果自评组合式设计]一、1
×二、(1)能转移到受体细胞,并且整合到受体细胞染色体的DNA上
(2)利用农杆菌T-DNA的可转移性,将目的基因插入T-DNA上通过农杆菌的转化,将目的基因导入受体细胞,并整合到植物细胞的染色体上
(3)双子叶植物和裸子植物
高频考点要通关[需重点强化的2个重难点]例1:解析:选C图中pBR322质粒、抗病基因和重组质粒都是DNA分子,其基本组成单位都是脱氧核苷酸;通过分析含抗病基因的DNA,可知该DNA含三个限制酶切割位点,其中SmaⅠ的切割位点位于抗病基因内部,因此用PstⅠ、EcoRⅠ才能完整地切下该抗病基因;一个质粒被限制酶EcoRⅠ、PstⅠ、SmaⅠ同时切割后可得到3个DNA片段,产生6个末端,从表格信息可知,EcoRⅠ、PstⅠ切割产生的4个末端是黏性末端,而SmaⅠ切割产生的2个末端是平末端;当EcoRⅠ切割质粒时,氨苄青霉素抗性基因(Ampr)已受到破坏,因此,在筛选时,应将受体细胞置于含有四环素的培养基上培养
例2:解析:(1)如果目的基因比较小,核苷酸序列又已知可以通过DNA合成仪用化学方法直接人工合成
(2)②过程中应先用同一种限制酶切割目的基因和载体,然后用DNA连接酶将切下来的DNA片段拼接成重组DNA
构建的基因表达载体除了目的基因和标记基因外,还必须有启动子、终止子