专题2微生物的培养与应用课题3分解纤维素的微生物的分离学习目标•了解纤维素的组成•简述纤维素酶的种类和作用•从土壤中分离出分解纤维素的微生物•分解纤维所的微生物的作用1、纤维素的组成一、纤维素和纤维素酶阅读课本27页基础知识部分第一、二段，回答下列问题：元素组成：CHO组成单位：葡萄糖特点：纤维素是一种由葡萄糖首尾相连而成的高分子化合物，不溶于水和有机溶剂，性质比较稳定。2、纤维素在生物圈的分布状况？纤维素是地球上含量最丰富的多糖类物质。植物的根、茎、叶等器官都含有大量的纤维素。其中棉花是自然界中纤维素含量最高的天然产物。•(1)纤维素存在于何种细胞的何种结构中？有何功能？•(2)自然界中的纤维素是如何被利用的？思考纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶。纤维二糖C1酶、Cx酶葡萄糖苷酶葡萄糖纤维素在3种酶的协同作用下，纤维素最终水解成葡萄糖，为微生物提供营养。3、纤维素酶的组成及作用？4.实验：纤维素酶分解纤维素的实验甲乙讨论：乙试管的滤纸条为什么会消失？（注：滤纸条由什么组成？）甲试管的作用是什么？二、纤维素分解菌的筛选1.纤维素分解菌的筛选方法染色法：这种方法能够通过颜色反应直接对微生物进行筛选刚果红2、纤维素分解菌的筛选方法的原理刚果红可以与形成红色复合物，但并不和、发生这种反应。当纤维素被纤维素酶分解后,刚果红—纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以为中心的。这样我们可以通过是否产生透明圈来筛选.纤维素纤维二糖葡萄糖透明圈纤维素分解菌纤维素分解菌可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。2、纤维素分解菌的筛选方法的原理1、下列关于纤维素酶的说法，错误的是A、纤维素酶是一种复合酶，至少包括三种B、纤维素酶可把纤维素分解成葡萄糖C、纤维素酶可用于去掉植物的细胞壁D、葡萄糖苷酶可把纤维素分解成葡萄糖2、利用刚果红法可以筛选出纤维素分解菌，下列说法错误的是A、刚果红能与纤维素形成红色复合物B、刚果红能与纤维二糖形成红色复合物C、刚果红不能与葡萄糖形成红色复合物D、若培养基上产生了透明圈，则说明已筛选出了纤维素分解菌三、实验设计——分离分解纤维素的微生物土壤取样选择培养梯度稀释将样品涂布到培养基挑选产生透明圈的菌落①分布环境富含纤维素的环境中操作步骤生物与环境的互相依存关系，在富含纤维素的环境中纤维素分解菌的含量相对提高，因此从这种土壤中获得目的微生物的几率要高于普通环境。②原因一、土壤取样③实例：树林中多年落叶形成的腐殖土，多年积累的枯枝败叶等。④讨论:如果找不到合适的环境，可以将滤纸埋在土壤中，将滤纸埋在土壤中有什么作用？你认为滤纸应该埋在土壤中多深？将滤纸埋在土壤中能使纤维素分解菌相对集中，实际上是人工设置纤维素分解菌生存的适宜环境。一般应将滤纸埋于深约10cm左右的土壤中。〖旁栏思考题〗为什么选择培养能够“浓缩”所需的微生物？在选择培养的条件下，可以使那些能够适应这种营养条件的微生物得到迅速繁殖，而那些不适应这种营养条件的微生物的繁殖被抑制，因此可以起到“浓缩”的作用。二、选择培养1、选择培养的目的：增加纤维素分解菌的浓度，以确保能够从样品中分离到所需要的微生物2、制备选择培养基参照课本29页旁栏中的比例配置，回答下列问题a、该配方是液体培养基还是固体培养基？为什么？b、这个培养基对微生物是否具有选择作用？如果具有，是如何进行选择的？c、你能否设计一个对照实验，说明选择培养基的作用是液体培养基，原因是配方中无凝固剂有选择作用，本配方中主要碳源是纤维素，所以能分解纤维素的微生物可以大量繁殖用牛肉膏蛋白胨培养基与之对照培养基组成提供主要的营养物质纤维素粉5g碳源（主要能源）NaNO31g氮源、无机盐KCl0.5gNa2HPO4·7H2O1.2gKH2PO40.9gMgSO4·7H2O0.5g无机盐酵母膏0.5g碳源、氮源水解酪素0.5g氮素溶解后，蒸馏水定容至1000mL水纤维素分解菌的选择培养基二、选择培养按照课题1的稀释操作方法，将选择培养后的培养基进行等比稀释101～106倍。三.梯度稀释101102103104105106四.将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上...
