检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质1
实验原理斐林试剂苏丹Ⅲ橘黄色红色砖红色沉淀紫色苏丹Ⅳ双缩脲试剂鉴定物质试剂实验现象还原性糖脂肪蛋白质淀粉碘液蓝色生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验原理选材:含糖量较高的白色或近于白色的植物组织(排除色素对显色的干扰),苹果、梨最好
实验流程(步骤)1
可溶性还原糖制备组织样液:制浆:去皮、切块、研磨,过滤:(用单层纱布)取液:(2mL)显色反应现象:(用前混匀)50~65
C水浴加热2min葡萄糖,果糖,麦芽糖;蔗糖为非还原性糖还原糖的检测和观察:还原糖的检测结果还原糖的检测结果2
脂肪的鉴定取材:花生种子(浸泡3-4h),去皮,将子叶削成薄片制片:①选取最薄的薄片移至载玻片中央②在薄片上滴加苏丹Ⅲ(或苏丹Ⅳ)染液2-3滴,染色2-3min③滴加体积分数为50%的酒精溶液1—2滴,洗去浮色(多余的苏丹Ⅲ)④吸去余液,滴1-2滴蒸馏水,盖上盖玻片,制成临时装片显微观察:先在低倍镜下找到已着色的薄片,后用高倍镜观察现象:有被染成橘黄色(或红色)的脂肪微粒脂肪微粒脂肪的检测结果3
蛋白质的鉴定选材与制备组织样液:黄豆组织样液(或鸡蛋蛋清稀释液)[黄豆浸泡→去皮→切片→研磨→过滤→滤液]显色反应现象:无色紫色或紫红色(创设碱性条件)(提供Cu2+)蛋白质的检测结果4
淀粉的鉴定取材:马铃薯匀浆检测:碘液2滴现象:摇匀后变成蓝色问题探讨:1、在做还原糖、蛋白质鉴定的实验时,为什么要留出一部分样液
作对照2、使用双缩脲试剂时为什么B液只能加3~4滴而不能过量
过量的双缩脲试剂B会与试剂A反应,使溶液呈蓝色,而掩盖生成的紫色
3、为什么斐林试剂要现配现用,不能放置太久
时间太长,Cu(OH)2悬浊液就沉淀在试管底部而无法参与反应
深化比较项目试剂及成分原理溶液浓度方法加热与否结果可溶还原糖的鉴定斐林试剂NaOH和CuSO4砖红色沉淀