2008年日本东京国际花卉博览会上亮相的世界首批转基因玫瑰能发光的水母能否能否让热能否能否让热带鱼也能发光带鱼也能发光??设想设想不能发光的热带斑马鱼第2节基因工程及其应用第6章从杂交育种到基因工程问题探讨问题探讨(P(P102102))讨论：讨论：11、把人胰岛素基因、把人胰岛素基因“嫁接”到大肠杆菌“嫁接”到大肠杆菌中去后与普通细菌有中去后与普通细菌有什么不同？什么不同？22、为什么能把人的、为什么能把人的基因“嫁接”到细菌基因“嫁接”到细菌上？上？33、怎样把人胰岛素、怎样把人胰岛素基因“嫁接”到大肠基因“嫁接”到大肠杆菌中去？杆菌中去？基因工程：又叫基因拼接技术或DNA重组技术。通俗的说，就是按照人们的意愿，把一种生物的某种基因提取出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向地改造生物的遗传性状。基因工程的别名基因工程的别名操作环境操作环境操作对象操作对象操作水平操作水平原理原理目的目的基因拼接技术或基因拼接技术或DNADNA重组技术重组技术生物体外基因DNA分子水平基因重组定向改造生物的遗传性状培育新品种课本P102二、基因操作的工具11、基因的、基因的指指““限制性核酸内切酶限制性核酸内切酶””一种限制酶一种限制酶只能识别只能识别一种特定的一种特定的核苷酸序列核苷酸序列,,并在并在特定切点特定切点切割切割特点特点::“”“”这个特点说明了：酶具有专一性1.基因的“剪刀”──限制性内切酶（限制酶）一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并在特定的切点上切割DNA分子。专一性如:EcoRI限制酶限制限制酶酶•什么叫黏性末端？什么叫黏性末端？被限制酶切开的被限制酶切开的DNADNA两条两条单链的切单链的切口口，带有几个，带有几个伸出的核苷酸伸出的核苷酸，他们之间正，他们之间正好好互补配对互补配对，这样的切口叫，这样的切口叫黏性末端黏性末端。。黏性末端黏性末端黏性末端：DNA分子在限制酶的作用下形成的具有互补碱基的单链延伸末端结构。当限制酶从识别序列的中心轴线两侧切开时，产生的是黏性末端。限制性内切酶（EcoRⅠ）作用过程点击播放点击播放22：基因工程的：基因工程的指指““DNADNA连接连接酶酶””““””作用：作用：连接“梯子”断口的连接“梯子”断口的“扶手”而非“梯子”“扶手”而非“梯子”中间的“踏板”。中间的“踏板”。其作用与限制性内切酶其作用与限制性内切酶相反，作用点相同相反，作用点相同２、基因的针线──DNA连接酶连接酶的作用是：将互补配对的两个黏性末端连接起来，使之成为一个完整的DNA分子。基因的针线：DNA连接酶GAATTCCTTAAGGAATTCCTTAAGGCTTAAAATTCGGCTTAAAATTCGGCTTAAAATTCG用同种限制酶切割DNA连接酶连接的是DNA骨架上的缺口，不是碱基间的氢键基因的针线——DNA连接酶黏合只能使互补的碱基连接起来问:黏性末端黏合的是什么部位？问：基因的针线--DNA连接酶连接的是什么部位?脱氧核糖与磷酸之间（3,5－磷酸二酯键）黏合只能使互补的碱基连接起来脱氧核糖和磷酸之间交替连接而构成的DNA骨架上的缺口，需靠DNA连接酶来“缝合”3,5－磷酸二酯键DNA连接酶作用部位：DNA连接酶的作用过程点击播放点击播放33、基因的运载体、基因的运载体（（22））条条件件①①能够能够在宿主细胞中在宿主细胞中复制复制并并稳定地稳定地保存保存②②具有具有多个限制酶切点，以便与多个限制酶切点，以便与外源基外源基因因连接连接③③具有具有标记基因标记基因，便于进行筛选，便于进行筛选（3）常用的运载体：质粒、噬菌体和动、植物病毒等（1）运载体的概念标记基因，便于进行检测。其中质粒存在于许多细菌和酵母菌等生物中,是细胞染色体外能够自主复制的很小的环状DNA分子.（4）它们的共同特点是都有侵染或进入宿主细胞的能力质粒的特点1、细胞染色体（或拟核DNA分子）外能自主复制的小型环状DNA分子；2、质粒的存在对宿主细胞无影响；3、质粒的复制只能在宿主细胞内完成。•第一步：提取目的基因三、基因工程基本步骤课本P103第二步、目的基因与运载体结合让目的基因的黏性末端与载体切口上的黏性末端互补配对后，在连接酶的作用下连接形成重组DNA分子。第三...
