凝聚胺介质交叉配血试验操作规程VIP专享VIP免费

凝聚胺介质交叉配血试验操作规程(SOP文件 ) 1 目的作为介质辅助用于完全抗体及不完全抗体的临床筛选检测及辅助用于临床交叉配血实验。2 检验原理红细胞表面带有大量的负电荷，以避免其产生自发性聚集，当红细胞悬浮在电解质时，阳离子会被红细胞的负电荷所吸引，此时红细胞则被扩散的双层离子云所围绕，而形成Zeta 电位， Zeta 电位决定红细胞之间的排斥作用。凝聚胺技术首先利用低离子溶液（LIM) ，降低介质的离子强度，减少红细胞周围的阳离子云，以促进红细胞和血清 （血浆）中的抗体结合。其后，加入凝聚胺（Polybrene) 溶液，它是一种高价阳离子多聚物、肝素中和剂，溶解后能产生很多正电荷，可以中和红细胞表面带有的负电荷，使红细胞Zeta 电位降低，缩短红细胞之间的距离，使红细胞产生非特异性的凝聚。最后，加入悬浮液 （Resuspending),Resuspending具有中和凝聚胺（Polybrene)阳离子的作用，使正常的红细胞非特异性凝聚散开，试验结果为阴性；但如果红细胞被相应的抗体致敏，则会被凝聚胺凝结，凝集就不会散开，试验结果为阳性。3 储存条件及有效期未开封试剂应贮存于2℃~25℃、相对湿度不大于80%，无腐蚀性气体的室内；已开封试剂应贮存于相对湿度不大于80%，无腐蚀性气体和通风良好的室温环境，试剂用后应及时拧紧瓶盖保存；未开封试剂的有效期为二年，在有效期内的已开封试剂应在开封后的6 个月内使用完。4 样本要求 4.1新鲜血清，含EDTA抗凝血浆、 3%~5%的红细胞悬液。 4.2不能使用溶血标本及含枸橼酸钠、肝素抗凝血浆标本。5 检验方法辅助交叉配血试验5.1取试管二支，标主次侧，主侧管加病人血清（血浆）2滴，加供血者3%~5%红细胞悬液（洗涤或不洗涤均可）1 滴，次侧管反之。5.2 各加 LIM0.65ml, 混合均匀后，再各加Polybrene溶液 2滴，并混合均匀。5.3 用离心机 3400 转/min( 相当于 1000g 离心力）离心 10 秒，然后把上清液倒掉，不要沥干，让管底残留约0.1ml 液体。5.4轻轻摇动试管，目测红细胞有无凝集，如无凝集，则必须要重做。5.5 最后加入 Resuspending 2 滴，轻轻摇动试管混合并同时观察结果。如果在60 秒内凝集散开，代表是由Polybrene引起的非特异性聚集，配血结果相合；如凝集不散开，则为红细胞抗原抗体结合的特异性反应，配血结果不相合。如反应可疑，可进一步倒在玻片上用显微镜观察。6 注意事项 6.1可以用含 EDTA之血浆代替血清使用。 6.2若病人血清（血浆）含肝素，如...