Exosome 简 介 ， 提 取 ， 分 析 （全）一， Exosome简 介最近几年， 一种叫做 Exosome的小囊泡正受到大家广泛的关注。Exosome是直径约为 30-150nm， 密度在 1.13-1.21g/m1的小囊泡。Exosome天然存在于体液中， 包括血液、唾液、尿液和母乳， 外泌体(Exosome)是活细胞分 泌的来源于晚期核内体(也称为多囊泡体 )的膜性囊泡。Exosome在 30年前被人们所发现。早期的研究认为， exosome执行蛋白运输功能， 特异靶定受体细胞， 交换蛋白和脂类或引发下游信号事件。直到 2007年， 研究人员发现 exosome也运输核酸， 参与细胞间通讯。总之， 其蛋白、RNA和脂肪成分 特异， 且携带了一些重要的信号分 子， 有望在多种疾病的早期诊断中发挥作用， 这使得 exosome的市场也在快速扩展， 并成为热门的研究对象。不同组织细胞来源 exosome由于携带的蛋白质不同， 而能够发挥不同的生物学功能。例如， 肿瘤细胞分 泌的 exosome能够介 导血管再生肿瘤细胞增殖及免疫逃逸；而树突状细胞源性 exosome则能够引起机体有效的抗肿瘤免疫应答。目前研究发现，Exosome内含有与细胞来源相关的蛋白质 rRNA和 microRNA，并且 exosome能够通过生物屏障， 在细胞间传递功能性核酸分 子， 从而发挥各种生物学功能，故 exosome有望成为一种新型给药途径及基因治疗载体。 Exosome携带蛋白质包括源细胞非特异性和源细胞特异性两类蛋白分 子。前者可能与 exosome的生物发生和生物学作用有关 ，主要包括：细胞溶质蛋白、参与细胞内信号转导的蛋白、各种代谢酶、热休克蛋白和四跨膜蛋白；另一类是特殊蛋白质，这类蛋白质只存在于某种特殊的细胞分泌 的 exosome，而这些特定细胞源的 exosome与其生物学功能有着密切联系，例如分子来源的 Exosome上含有 MHCII类分子。二，Exosome提取Exosome是由活细胞分泌的，它是一种亚细胞成分，组要成分是磷脂双分子和携带的膜性分子，其界定依据形态学和生物化学及提取方式不同细胞源的exosome是不同的，这些不同的理化性质有利于 exosome的提取。从体外培养的细胞中分离和提取 exosome的主要方法是高速离心法，这种方法能分离出大的碎片和已经死亡细胞， 然后再通过超速离心法分离 提取 exosome最 后利用糖 梯度 ，使 脂质囊 性质的 exosome漂 浮 于上面 。具 体来说 ，Exosome的研 究 方式是分离/捕 获 小 囊 泡 ，并 拷 问 它所 携带的货 物。就 目 ...
